广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
4期
524-527
,共4页
邓伟雄%罗时敏%蓝代颜%梁伟灿%臧林泉
鄧偉雄%囉時敏%藍代顏%樑偉燦%臧林泉
산위웅%라시민%람대안%량위찬%장림천
噬菌体肽库%多肽%肺癌%NCI-H1299%减性筛选
噬菌體肽庫%多肽%肺癌%NCI-H1299%減性篩選
서균체태고%다태%폐암%NCI-H1299%감성사선
目的 利用Phage display随机肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,并通过ELISA和免疫组化鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础.方法 以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二肤库进行四轮减性筛选,挑取单克隆、扩增纯化噬菌体、并经ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力;对阳性克隆提取质粒,浏序后合成多肤,多肽标记荧光素FITC,以其在肺癌组织芯片上鉴定多肽的亲和力及特异性.结果 经ELISA初步鏊定,随机挑选的18个单克隆中,其中3号对NCI-H1299亲和力最高,将其命名为Phage ZL-3.细胞免疫荧光试验进一步证明,荧光素标记的多肽FITC-ZL-3对NCI-H1299具有高亲和力.结论 利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞具有较高亲和力的多肽ZL-3,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础.
目的 利用Phage display隨機肽庫篩選齣與肺癌NCI-H1299細胞特異性結閤的多肽,併通過ELISA和免疫組化鑒定其特異性和親和力,為尋找肺癌早期診斷和治療標誌物打下基礎.方法 以肺癌細胞NCI-H1299為靶細胞,肺二倍體成纖維細胞MRC-5為吸附細胞,在37℃下對噬菌體隨機十二膚庫進行四輪減性篩選,挑取單剋隆、擴增純化噬菌體、併經ELISA初步鑒定噬菌體剋隆親和力;對暘性剋隆提取質粒,瀏序後閤成多膚,多肽標記熒光素FITC,以其在肺癌組織芯片上鑒定多肽的親和力及特異性.結果 經ELISA初步鏊定,隨機挑選的18箇單剋隆中,其中3號對NCI-H1299親和力最高,將其命名為Phage ZL-3.細胞免疫熒光試驗進一步證明,熒光素標記的多肽FITC-ZL-3對NCI-H1299具有高親和力.結論 利用噬菌體隨機十二肽成功篩選齣與肺癌細胞具有較高親和力的多肽ZL-3,為肺癌的早期診斷和靶嚮治療奠定基礎.
목적 이용Phage display수궤태고사선출여폐암NCI-H1299세포특이성결합적다태,병통과ELISA화면역조화감정기특이성화친화력,위심조폐암조기진단화치료표지물타하기출.방법 이폐암세포NCI-H1299위파세포,폐이배체성섬유세포MRC-5위흡부세포,재37℃하대서균체수궤십이부고진행사륜감성사선,도취단극륭、확증순화서균체、병경ELISA초보감정서균체극륭친화력;대양성극륭제취질립,류서후합성다부,다태표기형광소FITC,이기재폐암조직심편상감정다태적친화력급특이성.결과 경ELISA초보오정,수궤도선적18개단극륭중,기중3호대NCI-H1299친화력최고,장기명명위Phage ZL-3.세포면역형광시험진일보증명,형광소표기적다태FITC-ZL-3대NCI-H1299구유고친화력.결론 이용서균체수궤십이태성공사선출여폐암세포구유교고친화력적다태ZL-3,위폐암적조기진단화파향치료전정기출.
