中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
45期
8439-8442
,共4页
常氧%低氧%胶质源性神经营养因子%中脑神经干细胞%多巴胺能神经元%酪氨酸羟化酶
常氧%低氧%膠質源性神經營養因子%中腦神經榦細胞%多巴胺能神經元%酪氨痠羥化酶
상양%저양%효질원성신경영양인자%중뇌신경간세포%다파알능신경원%락안산간화매
背景:神经干细胞的定向诱导分化和扩增受细胞自身基因和外来信号的调控.目的:观察中脑源性神经干细胞在常氧、低氧和胶质源性神经营养因子诱导下向多巴胺能神经元的分化情况.方法:无菌条件下分离E12小鼠胚胎腹侧中脑组织,胰酶消化和机械吹打制成单细胞悬液,在无血清培养基中培养扩增;Nestin免疫细胞化学染色方法鉴定神经干细胞.在有血清培养基中对纯化神经干细胞自然分化;神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白免疫细胞化学染色方法分别鉴定神经元和星形胶质细胞.建立常氧和低氧环境,设置常氧组、常氧+胶质源性神经营养因子组、低氧组、低氧+胶质源性神经营养因子组,按实验分组在有血清条件下诱导分化.结果与结论:在低氧条件下,中脑神经干细胞向多巴胺能神经元分化均高于常氧组;尤其是低氧环境和胶质源性神经营养因子诱导下向多巴胺能神经元分化比例更高,表型更成熟.说明低氧环境下胶质源性神经营养因子可明显促进中脑神经干细胞分化为数量足够、形态及功能成熟的多巴胺能神经元.
揹景:神經榦細胞的定嚮誘導分化和擴增受細胞自身基因和外來信號的調控.目的:觀察中腦源性神經榦細胞在常氧、低氧和膠質源性神經營養因子誘導下嚮多巴胺能神經元的分化情況.方法:無菌條件下分離E12小鼠胚胎腹側中腦組織,胰酶消化和機械吹打製成單細胞懸液,在無血清培養基中培養擴增;Nestin免疫細胞化學染色方法鑒定神經榦細胞.在有血清培養基中對純化神經榦細胞自然分化;神經元特異性烯醇化酶和膠質纖維痠性蛋白免疫細胞化學染色方法分彆鑒定神經元和星形膠質細胞.建立常氧和低氧環境,設置常氧組、常氧+膠質源性神經營養因子組、低氧組、低氧+膠質源性神經營養因子組,按實驗分組在有血清條件下誘導分化.結果與結論:在低氧條件下,中腦神經榦細胞嚮多巴胺能神經元分化均高于常氧組;尤其是低氧環境和膠質源性神經營養因子誘導下嚮多巴胺能神經元分化比例更高,錶型更成熟.說明低氧環境下膠質源性神經營養因子可明顯促進中腦神經榦細胞分化為數量足夠、形態及功能成熟的多巴胺能神經元.
배경:신경간세포적정향유도분화화확증수세포자신기인화외래신호적조공.목적:관찰중뇌원성신경간세포재상양、저양화효질원성신경영양인자유도하향다파알능신경원적분화정황.방법:무균조건하분리E12소서배태복측중뇌조직,이매소화화궤계취타제성단세포현액,재무혈청배양기중배양확증;Nestin면역세포화학염색방법감정신경간세포.재유혈청배양기중대순화신경간세포자연분화;신경원특이성희순화매화효질섬유산성단백면역세포화학염색방법분별감정신경원화성형효질세포.건립상양화저양배경,설치상양조、상양+효질원성신경영양인자조、저양조、저양+효질원성신경영양인자조,안실험분조재유혈청조건하유도분화.결과여결론:재저양조건하,중뇌신경간세포향다파알능신경원분화균고우상양조;우기시저양배경화효질원성신경영양인자유도하향다파알능신경원분화비례경고,표형경성숙.설명저양배경하효질원성신경영양인자가명현촉진중뇌신경간세포분화위수량족구、형태급공능성숙적다파알능신경원.
