生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
10期
210-214
,共5页
蔡翠霞%肖维威%康文杰%周琳华%吴永彬%郑远金%马文丽
蔡翠霞%肖維威%康文傑%週琳華%吳永彬%鄭遠金%馬文麗
채취하%초유위%강문걸%주림화%오영빈%정원금%마문려
Chelex-100法%CTAB法%DNA提取%PCR
Chelex-100法%CTAB法%DNA提取%PCR
Chelex-100법%CTAB법%DNA제취%PCR
旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法.分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,并研究两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麦和水稻等其他转基因农产品的应用效果.结果表明,改良Chelex-100法能够快速在1.5h之内从样品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR扩增反应,产物电泳条带清晰明亮.两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果未见明显差别.该方法在玉米、小麦和水稻等转基因农产品的应用效果稳定.因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作为PCR扩增模板用于转基因农产品检测.该方法具有经济、简便、快速、安全的特点,适合转基因农产品大规模筛选和鉴别.
旨在建立一種從轉基因農產品中快速提取DNA的方法.分彆採用改良Chelex-100法和常規CTAB法提取轉基因大豆GTS40-3-2基因組DNA,測其濃度和純度,PCR擴增其內源基因(Lectin)、啟動子(CaMV35S)和品繫特異性序列,對兩種方法進行比較和評價,併研究兩種方法提取的DNA在-20℃下保存一箇月內的檢測效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麥和水稻等其他轉基因農產品的應用效果.結果錶明,改良Chelex-100法能夠快速在1.5h之內從樣品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR擴增反應,產物電泳條帶清晰明亮.兩種方法提取的DNA在-20℃下保存一箇月內的檢測效果未見明顯差彆.該方法在玉米、小麥和水稻等轉基因農產品的應用效果穩定.因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作為PCR擴增模闆用于轉基因農產品檢測.該方法具有經濟、簡便、快速、安全的特點,適閤轉基因農產品大規模篩選和鑒彆.
지재건립일충종전기인농산품중쾌속제취DNA적방법.분별채용개량Chelex-100법화상규CTAB법제취전기인대두GTS40-3-2기인조DNA,측기농도화순도,PCR확증기내원기인(Lectin)、계동자(CaMV35S)화품계특이성서렬,대량충방법진행비교화평개,병연구량충방법제취적DNA재-20℃하보존일개월내적검측효과,이급개량Chelex-100법재옥미、소맥화수도등기타전기인농산품적응용효과.결과표명,개량Chelex-100법능구쾌속재1.5h지내종양품중제취DNA,소제취적DNA직접용우PCR확증반응,산물전영조대청석명량.량충방법제취적DNA재-20℃하보존일개월내적검측효과미견명현차별.해방법재옥미、소맥화수도등전기인농산품적응용효과은정.인차,개량Chelex-100법제취적DNA가이작위PCR확증모판용우전기인농산품검측.해방법구유경제、간편、쾌속、안전적특점,괄합전기인농산품대규모사선화감별.
