解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2012年
2期
126-129,133
,共5页
张洪开%具英花%徐韬钧%孙秀华%于爱鸣
張洪開%具英花%徐韜鈞%孫秀華%于愛鳴
장홍개%구영화%서도균%손수화%우애명
FOXO1%PI3K%MAPK%肺癌
FOXO1%PI3K%MAPK%肺癌
FOXO1%PI3K%MAPK%폐암
目的 探讨非小细胞肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K) /AKT和丝裂原活化蛋白激酶MAPK/ERK信号通路对Forkhead转录因子(Fox蛋白家族)FOXO1活性的影响及分子机制.方法 体外培养人非小细胞肺癌系A549,分别选用PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002和MAPK/ERK信号通路特异性抑制剂UO126及两种抑制剂联合处理细胞之后,MTT比色法检测其对细胞增殖的影响；Western blot检测蛋白FOXO1、p-FOXO1及信号下游蛋白Bim表达的变化；免疫荧光法检测FOXO1蛋白在A549细胞中亚细胞的定位的变化.结果 与对照组相比,LY294002和UO126都能明显地抑制A549细胞的增殖,且具有时间依赖性.Western blot结果显示,FOXO1的蛋白水平未见显著性变化,而FOXO1的磷酸化水平明显下降,Bim的表达相应增加.免疫荧光结果显示,FOXO1在A549细胞中的核转位增多.LY294002和UO126联合处理A549细胞时,较药物单独作用效果明显增加.结论 PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路能调节FOXO1磷酸化水平,且具有协同作用,抑制其转录活性.FOXO1通过激活Bim蛋白,促进细胞凋亡,抑制细胞的增殖.
目的 探討非小細胞肺癌中燐脂酰肌醇-3-激酶(PI3K) /AKT和絲裂原活化蛋白激酶MAPK/ERK信號通路對Forkhead轉錄因子(Fox蛋白傢族)FOXO1活性的影響及分子機製.方法 體外培養人非小細胞肺癌繫A549,分彆選用PI3K/AKT信號通路特異性抑製劑LY294002和MAPK/ERK信號通路特異性抑製劑UO126及兩種抑製劑聯閤處理細胞之後,MTT比色法檢測其對細胞增殖的影響；Western blot檢測蛋白FOXO1、p-FOXO1及信號下遊蛋白Bim錶達的變化；免疫熒光法檢測FOXO1蛋白在A549細胞中亞細胞的定位的變化.結果 與對照組相比,LY294002和UO126都能明顯地抑製A549細胞的增殖,且具有時間依賴性.Western blot結果顯示,FOXO1的蛋白水平未見顯著性變化,而FOXO1的燐痠化水平明顯下降,Bim的錶達相應增加.免疫熒光結果顯示,FOXO1在A549細胞中的覈轉位增多.LY294002和UO126聯閤處理A549細胞時,較藥物單獨作用效果明顯增加.結論 PI3K/AKT和MAPK/ERK信號通路能調節FOXO1燐痠化水平,且具有協同作用,抑製其轉錄活性.FOXO1通過激活Bim蛋白,促進細胞凋亡,抑製細胞的增殖.
목적 탐토비소세포폐암중린지선기순-3-격매(PI3K) /AKT화사렬원활화단백격매MAPK/ERK신호통로대Forkhead전록인자(Fox단백가족)FOXO1활성적영향급분자궤제.방법 체외배양인비소세포폐암계A549,분별선용PI3K/AKT신호통로특이성억제제LY294002화MAPK/ERK신호통로특이성억제제UO126급량충억제제연합처리세포지후,MTT비색법검측기대세포증식적영향；Western blot검측단백FOXO1、p-FOXO1급신호하유단백Bim표체적변화；면역형광법검측FOXO1단백재A549세포중아세포적정위적변화.결과 여대조조상비,LY294002화UO126도능명현지억제A549세포적증식,차구유시간의뢰성.Western blot결과현시,FOXO1적단백수평미견현저성변화,이FOXO1적린산화수평명현하강,Bim적표체상응증가.면역형광결과현시,FOXO1재A549세포중적핵전위증다.LY294002화UO126연합처리A549세포시,교약물단독작용효과명현증가.결론 PI3K/AKT화MAPK/ERK신호통로능조절FOXO1린산화수평,차구유협동작용,억제기전록활성.FOXO1통과격활Bim단백,촉진세포조망,억제세포적증식.
