生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
7期
193-196
,共4页
王飞飞%姚子昂%吴海歌%张胜霞
王飛飛%姚子昂%吳海歌%張勝霞
왕비비%요자앙%오해가%장성하
κ-卡拉胶酶%酶谱%改进%孵育时间
κ-卡拉膠酶%酶譜%改進%孵育時間
κ-잡랍효매%매보%개진%부육시간
对分离纯化后的κ-卡拉胶酶进行SDS-PAGE电泳和酶谱试验鉴定,比较k-卡拉胶酶活性鉴定中的两种酶谱试验方法.一种是先进行非变性PAGE电泳,电泳完毕,将电泳胶与事先准备好的底物胶叠合在一起,35℃孵育液孵育.另一种是在此试验方法基础上进行改进,直接在电泳分离胶中加入0.2％底物,进行SDS-PAGE电泳,电泳结束,用TritonX-100将电泳胶复性,孵育液孵育.试验结果表明改进后的酶谱方法操作简单,具有良好的灵敏度和精确的定位.同时,利用改进后的酶谱方法对k-卡拉胶酶活性进行了反应时间的研究,结果显示,反应时间为8h时,降解条带最清晰,最有利于相似分子量酶的辨别.
對分離純化後的κ-卡拉膠酶進行SDS-PAGE電泳和酶譜試驗鑒定,比較k-卡拉膠酶活性鑒定中的兩種酶譜試驗方法.一種是先進行非變性PAGE電泳,電泳完畢,將電泳膠與事先準備好的底物膠疊閤在一起,35℃孵育液孵育.另一種是在此試驗方法基礎上進行改進,直接在電泳分離膠中加入0.2％底物,進行SDS-PAGE電泳,電泳結束,用TritonX-100將電泳膠複性,孵育液孵育.試驗結果錶明改進後的酶譜方法操作簡單,具有良好的靈敏度和精確的定位.同時,利用改進後的酶譜方法對k-卡拉膠酶活性進行瞭反應時間的研究,結果顯示,反應時間為8h時,降解條帶最清晰,最有利于相似分子量酶的辨彆.
대분리순화후적κ-잡랍효매진행SDS-PAGE전영화매보시험감정,비교k-잡랍효매활성감정중적량충매보시험방법.일충시선진행비변성PAGE전영,전영완필,장전영효여사선준비호적저물효첩합재일기,35℃부육액부육.령일충시재차시험방법기출상진행개진,직접재전영분리효중가입0.2％저물,진행SDS-PAGE전영,전영결속,용TritonX-100장전영효복성,부육액부육.시험결과표명개진후적매보방법조작간단,구유량호적령민도화정학적정위.동시,이용개진후적매보방법대k-잡랍효매활성진행료반응시간적연구,결과현시,반응시간위8h시,강해조대최청석,최유리우상사분자량매적변별.
