福建农林大学学报（自然科学版）
福建農林大學學報（自然科學版）
복건농림대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUJIAN AGRICULTURE AND FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2012年
5期
518-522
,共5页
袁军%刘海荣%庄振宏%汪世华
袁軍%劉海榮%莊振宏%汪世華
원군%류해영%장진굉%왕세화
丁香假单胞菌%hrpA基因%融合蛋白%表达%纯化
丁香假單胞菌%hrpA基因%融閤蛋白%錶達%純化
정향가단포균%hrpA기인%융합단백%표체%순화
将丁香假单胞菌番茄变种DC3000(P.syringae pv.tomato DC3000)极毛蛋白hrpA基因克隆到pET32a(+)载体上,获得重组表达载体pET32a(+ )-hrpA.将重组质粒转入宿主E.coli BL21( DE3)溶源菌中,通过SDS-PAGE分析表明,在1.0mmol·L-1异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)的诱导下,重组子成功表达了分子质量约为28ku的融合蛋白(目标蛋白基因与硫氧还蛋白基因的融合表达产物).并利用Ni2+-NTA柱亲和层析分离获得纯化的HrpA蛋白,质量浓度为91.8 g·L-1.
將丁香假單胞菌番茄變種DC3000(P.syringae pv.tomato DC3000)極毛蛋白hrpA基因剋隆到pET32a(+)載體上,穫得重組錶達載體pET32a(+ )-hrpA.將重組質粒轉入宿主E.coli BL21( DE3)溶源菌中,通過SDS-PAGE分析錶明,在1.0mmol·L-1異丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)的誘導下,重組子成功錶達瞭分子質量約為28ku的融閤蛋白(目標蛋白基因與硫氧還蛋白基因的融閤錶達產物).併利用Ni2+-NTA柱親和層析分離穫得純化的HrpA蛋白,質量濃度為91.8 g·L-1.
장정향가단포균번가변충DC3000(P.syringae pv.tomato DC3000)겁모단백hrpA기인극륭도pET32a(+)재체상,획득중조표체재체pET32a(+ )-hrpA.장중조질립전입숙주E.coli BL21( DE3)용원균중,통과SDS-PAGE분석표명,재1.0mmol·L-1이병기류대-β-D반유당감(IPTG)적유도하,중조자성공표체료분자질량약위28ku적융합단백(목표단백기인여류양환단백기인적융합표체산물).병이용Ni2+-NTA주친화층석분리획득순화적HrpA단백,질량농도위91.8 g·L-1.
