中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2007年
1期
69-71
,共3页
丁惠锋%汤亭亭%刘荣%李保国%楼觉人%戴尅戎
丁惠鋒%湯亭亭%劉榮%李保國%樓覺人%戴尅戎
정혜봉%탕정정%류영%리보국%루각인%대극융
骨形态发生蛋白-2%基因转染%骨髓%间充质干细胞%微囊
骨形態髮生蛋白-2%基因轉染%骨髓%間充質榦細胞%微囊
골형태발생단백-2%기인전염%골수%간충질간세포%미낭
目的 观察转基因骨髓间充质干细胞的微囊化包裹方法和骨形态发生蛋白-2(BMP-2)释放效应.方法 利用高压微电场制备由海藻酸纳和多聚赖胺酸组成的微囊(细胞浓度为3×106 个/ml,海藻酸钠浓度为1.5%)包被转β-gal(报告基因)或BMP-2基因的骨髓间充质干细胞,根据X-gal染色观察细胞在微囊内的存活情况,ELISA方法检测其所释放的BMP-2蛋白量,共培养方法检测其生物学活性.结果 7、14、21、28 d时微囊内转基因细胞X-gal染色均为阳性.包裹后30d,培养液上清中仍可检测到BMP-2蛋白.转BMP-2基因微囊化细胞与未包裹骨髓间充质干细胞共培养10 d后,ALP活性定量检测结果表明,Adv-hBMP-2转染细胞组ALP活性为(52.537±1.774)U/ml,明显高于未转染细胞组的(42.336±0.857)U/ml,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 微囊化转基因干细胞生长良好,能持续分泌BMP-2蛋白并促进干细胞向成骨细胞方向分化.
目的 觀察轉基因骨髓間充質榦細胞的微囊化包裹方法和骨形態髮生蛋白-2(BMP-2)釋放效應.方法 利用高壓微電場製備由海藻痠納和多聚賴胺痠組成的微囊(細胞濃度為3×106 箇/ml,海藻痠鈉濃度為1.5%)包被轉β-gal(報告基因)或BMP-2基因的骨髓間充質榦細胞,根據X-gal染色觀察細胞在微囊內的存活情況,ELISA方法檢測其所釋放的BMP-2蛋白量,共培養方法檢測其生物學活性.結果 7、14、21、28 d時微囊內轉基因細胞X-gal染色均為暘性.包裹後30d,培養液上清中仍可檢測到BMP-2蛋白.轉BMP-2基因微囊化細胞與未包裹骨髓間充質榦細胞共培養10 d後,ALP活性定量檢測結果錶明,Adv-hBMP-2轉染細胞組ALP活性為(52.537±1.774)U/ml,明顯高于未轉染細胞組的(42.336±0.857)U/ml,差異有統計學意義(P＜0.05).結論 微囊化轉基因榦細胞生長良好,能持續分泌BMP-2蛋白併促進榦細胞嚮成骨細胞方嚮分化.
목적 관찰전기인골수간충질간세포적미낭화포과방법화골형태발생단백-2(BMP-2)석방효응.방법 이용고압미전장제비유해조산납화다취뢰알산조성적미낭(세포농도위3×106 개/ml,해조산납농도위1.5%)포피전β-gal(보고기인)혹BMP-2기인적골수간충질간세포,근거X-gal염색관찰세포재미낭내적존활정황,ELISA방법검측기소석방적BMP-2단백량,공배양방법검측기생물학활성.결과 7、14、21、28 d시미낭내전기인세포X-gal염색균위양성.포과후30d,배양액상청중잉가검측도BMP-2단백.전BMP-2기인미낭화세포여미포과골수간충질간세포공배양10 d후,ALP활성정량검측결과표명,Adv-hBMP-2전염세포조ALP활성위(52.537±1.774)U/ml,명현고우미전염세포조적(42.336±0.857)U/ml,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 미낭화전기인간세포생장량호,능지속분비BMP-2단백병촉진간세포향성골세포방향분화.
