山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
43期
29-31
,共3页
卫艳萍%马云云%何婷玉%冯龙%郭文涛%赵国强
衛豔萍%馬雲雲%何婷玉%馮龍%郭文濤%趙國彊
위염평%마운운%하정옥%풍룡%곽문도%조국강
CXCR4%启动子%萤光素酶报告载体
CXCR4%啟動子%螢光素酶報告載體
CXCR4%계동자%형광소매보고재체
目的 构建并鉴定人CXCR4 基因启动子萤光素酶报告载体,为AIDS的靶向基因治疗奠定基础.方法 利用PCR技术扩增人CXCR4基因启动子的核心片段,克隆至含新霉素抗性的萤光素酶表达载体pGL3-neo,构建含CXCR4启动子的萤光素酶表达载体pGL3-neo-CXCR4,重组子经双酶切、PCR及测序鉴定.再将构建的载体用脂质体转染体外培养的Jurkat细胞株,检测萤光素酶的表达活性.结果 扩增得到CXCR4基因启动子序列,克隆入pGL3-neo-CXCR4的CXCR4基因启动子序列与GenBank报道的一致,实验组(pGL3-neo-CXCR4组)萤光素酶的表达活性为869 159.0±62 618.8,与空白组(未转染组)的464.2±44.0和对照组(pGL3-neo组)的39 088.4±3 867.9相比,差异有统计学意义(F=1415.124,P均＜0.05).结论 成功构建了含人CXCR4基因启动子的萤光素酶报告基因表达载体pGL3-neo-CXCR4.
目的 構建併鑒定人CXCR4 基因啟動子螢光素酶報告載體,為AIDS的靶嚮基因治療奠定基礎.方法 利用PCR技術擴增人CXCR4基因啟動子的覈心片段,剋隆至含新黴素抗性的螢光素酶錶達載體pGL3-neo,構建含CXCR4啟動子的螢光素酶錶達載體pGL3-neo-CXCR4,重組子經雙酶切、PCR及測序鑒定.再將構建的載體用脂質體轉染體外培養的Jurkat細胞株,檢測螢光素酶的錶達活性.結果 擴增得到CXCR4基因啟動子序列,剋隆入pGL3-neo-CXCR4的CXCR4基因啟動子序列與GenBank報道的一緻,實驗組(pGL3-neo-CXCR4組)螢光素酶的錶達活性為869 159.0±62 618.8,與空白組(未轉染組)的464.2±44.0和對照組(pGL3-neo組)的39 088.4±3 867.9相比,差異有統計學意義(F=1415.124,P均＜0.05).結論 成功構建瞭含人CXCR4基因啟動子的螢光素酶報告基因錶達載體pGL3-neo-CXCR4.
목적 구건병감정인CXCR4 기인계동자형광소매보고재체,위AIDS적파향기인치료전정기출.방법 이용PCR기술확증인CXCR4기인계동자적핵심편단,극륭지함신매소항성적형광소매표체재체pGL3-neo,구건함CXCR4계동자적형광소매표체재체pGL3-neo-CXCR4,중조자경쌍매절、PCR급측서감정.재장구건적재체용지질체전염체외배양적Jurkat세포주,검측형광소매적표체활성.결과 확증득도CXCR4기인계동자서렬,극륭입pGL3-neo-CXCR4적CXCR4기인계동자서렬여GenBank보도적일치,실험조(pGL3-neo-CXCR4조)형광소매적표체활성위869 159.0±62 618.8,여공백조(미전염조)적464.2±44.0화대조조(pGL3-neo조)적39 088.4±3 867.9상비,차이유통계학의의(F=1415.124,P균＜0.05).결론 성공구건료함인CXCR4기인계동자적형광소매보고기인표체재체pGL3-neo-CXCR4.
