上海医学
上海醫學
상해의학
SHANGHAI MEDICAL JOURNAL
2010年
6期
579-584
,共6页
臧远胜%修清玉%王桂芳%李兵%石昭泉%方正%陈吉泉
臧遠勝%脩清玉%王桂芳%李兵%石昭泉%方正%陳吉泉
장원성%수청옥%왕계방%리병%석소천%방정%진길천
GATA-3抑制因子%T淋巴细胞因子%支气管哮喘%可诱导共刺激分子
GATA-3抑製因子%T淋巴細胞因子%支氣管哮喘%可誘導共刺激分子
GATA-3억제인자%T림파세포인자%지기관효천%가유도공자격분자
目的 了解GATA-3抑制因子(ROG)负向调控1型辅助性T淋巴细胞(Th1)因子和2型辅助性T淋巴细胞(Th2)因子表达的机制.方法 在获取初始状态的Th1和Th2细胞后,采用基因转染技术构建ROG获得性高表达的Th1和Th2细胞模型,采用基因表达沉默技术构建ROG获得性表达沉默的Th1和Th2细胞模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western印迹法检测ROG可能的靶点分子在ROG呈不同表达状态的Th1和Th2细胞中的表达情况,同时采用酶联免疫吸附试验检测Th1细胞因子和Th2细胞因子的表达情况.结果 与初始状态的Th1和Th2细胞相比,经ROG-pcDNA3.1转染的Th1和Th2细胞中ROG基因及蛋白的表达水平显著升高(P值均＜0.01),ICOS基因及蛋白的表达水平显著降低(P值均＜0.01);经ROGsiRNA转染的Th1和Th2细胞中ROG基因及蛋白表达水平显著降低(P值均＜0.01),ICOS基因及蛋白的表达水平显著升高(P值均＜0.01).与初始状态的Th1细胞中干扰索(IFN)-γ的表达水平相比,经ROGpcDNA3.1转染的Th1细胞中IFN-γ的表达水平显著降低(P＜0.01),经ROG-siRNA转染的Th1细胞中IFN-γ的表达水平显著升高(P＜0.01).与初始状态的Th2细胞中白细胞介素(IL)-4的表达水平相比,经ROG-pcDNA3.1转染的Th2细胞中IL-4的表达水平显著降低(P＜0.01),经ROG-siRNA转染的Th2细胞中IL-4的表达水平显著升高(P＜0.01).结论 ROG可能通过负调控可诱导共刺激分子的表达来负调控T淋巴细胞因子的表达.
目的 瞭解GATA-3抑製因子(ROG)負嚮調控1型輔助性T淋巴細胞(Th1)因子和2型輔助性T淋巴細胞(Th2)因子錶達的機製.方法 在穫取初始狀態的Th1和Th2細胞後,採用基因轉染技術構建ROG穫得性高錶達的Th1和Th2細胞模型,採用基因錶達沉默技術構建ROG穫得性錶達沉默的Th1和Th2細胞模型,採用實時熒光定量聚閤酶鏈反應和Western印跡法檢測ROG可能的靶點分子在ROG呈不同錶達狀態的Th1和Th2細胞中的錶達情況,同時採用酶聯免疫吸附試驗檢測Th1細胞因子和Th2細胞因子的錶達情況.結果 與初始狀態的Th1和Th2細胞相比,經ROG-pcDNA3.1轉染的Th1和Th2細胞中ROG基因及蛋白的錶達水平顯著升高(P值均＜0.01),ICOS基因及蛋白的錶達水平顯著降低(P值均＜0.01);經ROGsiRNA轉染的Th1和Th2細胞中ROG基因及蛋白錶達水平顯著降低(P值均＜0.01),ICOS基因及蛋白的錶達水平顯著升高(P值均＜0.01).與初始狀態的Th1細胞中榦擾索(IFN)-γ的錶達水平相比,經ROGpcDNA3.1轉染的Th1細胞中IFN-γ的錶達水平顯著降低(P＜0.01),經ROG-siRNA轉染的Th1細胞中IFN-γ的錶達水平顯著升高(P＜0.01).與初始狀態的Th2細胞中白細胞介素(IL)-4的錶達水平相比,經ROG-pcDNA3.1轉染的Th2細胞中IL-4的錶達水平顯著降低(P＜0.01),經ROG-siRNA轉染的Th2細胞中IL-4的錶達水平顯著升高(P＜0.01).結論 ROG可能通過負調控可誘導共刺激分子的錶達來負調控T淋巴細胞因子的錶達.
목적 료해GATA-3억제인자(ROG)부향조공1형보조성T림파세포(Th1)인자화2형보조성T림파세포(Th2)인자표체적궤제.방법 재획취초시상태적Th1화Th2세포후,채용기인전염기술구건ROG획득성고표체적Th1화Th2세포모형,채용기인표체침묵기술구건ROG획득성표체침묵적Th1화Th2세포모형,채용실시형광정량취합매련반응화Western인적법검측ROG가능적파점분자재ROG정불동표체상태적Th1화Th2세포중적표체정황,동시채용매련면역흡부시험검측Th1세포인자화Th2세포인자적표체정황.결과 여초시상태적Th1화Th2세포상비,경ROG-pcDNA3.1전염적Th1화Th2세포중ROG기인급단백적표체수평현저승고(P치균＜0.01),ICOS기인급단백적표체수평현저강저(P치균＜0.01);경ROGsiRNA전염적Th1화Th2세포중ROG기인급단백표체수평현저강저(P치균＜0.01),ICOS기인급단백적표체수평현저승고(P치균＜0.01).여초시상태적Th1세포중간우색(IFN)-γ적표체수평상비,경ROGpcDNA3.1전염적Th1세포중IFN-γ적표체수평현저강저(P＜0.01),경ROG-siRNA전염적Th1세포중IFN-γ적표체수평현저승고(P＜0.01).여초시상태적Th2세포중백세포개소(IL)-4적표체수평상비,경ROG-pcDNA3.1전염적Th2세포중IL-4적표체수평현저강저(P＜0.01),경ROG-siRNA전염적Th2세포중IL-4적표체수평현저승고(P＜0.01).결론 ROG가능통과부조공가유도공자격분자적표체래부조공T림파세포인자적표체.
