医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2011年
1期
65-69
,共5页
刘红芹%高海霞%石琳%屈浩%冯春玲%朱卫彬
劉紅芹%高海霞%石琳%屈浩%馮春玲%硃衛彬
류홍근%고해하%석림%굴호%풍춘령%주위빈
CD59分子%电转化%蛋白质A纯化
CD59分子%電轉化%蛋白質A純化
CD59분자%전전화%단백질A순화
目的 构建人matureCD59-mFC-pBOS真核表达载体,转染COSa细胞进行瞬时表达,对表达产物进行鉴定及纯化.方法 在人Jurkat细胞中提取细胞总RNA,运用RT-PCR方法 扩增matureCD59基因,定向克隆入带有mFC标签的真核表达载体pBOS中,大提质粒后通过电转仪转染COSa细胞,ELISA及特异抗体检测CD59的表达,并大量收集细胞上清用Protein A进行纯化.结果 构建了重组载体matureCD59-mFC-pBOS,瞬时转染COSa细胞,初步纯化得到天然表达的CD59抗原.结论 带有mFC 标签的CD59天然抗原的得到为制备抗人CD59单克隆抗体开辟了一条新的途径.
目的 構建人matureCD59-mFC-pBOS真覈錶達載體,轉染COSa細胞進行瞬時錶達,對錶達產物進行鑒定及純化.方法 在人Jurkat細胞中提取細胞總RNA,運用RT-PCR方法 擴增matureCD59基因,定嚮剋隆入帶有mFC標籤的真覈錶達載體pBOS中,大提質粒後通過電轉儀轉染COSa細胞,ELISA及特異抗體檢測CD59的錶達,併大量收集細胞上清用Protein A進行純化.結果 構建瞭重組載體matureCD59-mFC-pBOS,瞬時轉染COSa細胞,初步純化得到天然錶達的CD59抗原.結論 帶有mFC 標籤的CD59天然抗原的得到為製備抗人CD59單剋隆抗體開闢瞭一條新的途徑.
목적 구건인matureCD59-mFC-pBOS진핵표체재체,전염COSa세포진행순시표체,대표체산물진행감정급순화.방법 재인Jurkat세포중제취세포총RNA,운용RT-PCR방법 확증matureCD59기인,정향극륭입대유mFC표첨적진핵표체재체pBOS중,대제질립후통과전전의전염COSa세포,ELISA급특이항체검측CD59적표체,병대량수집세포상청용Protein A진행순화.결과 구건료중조재체matureCD59-mFC-pBOS,순시전염COSa세포,초보순화득도천연표체적CD59항원.결론 대유mFC 표첨적CD59천연항원적득도위제비항인CD59단극륭항체개벽료일조신적도경.
