生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
12期
171-174
,共4页
李爽%黄文斌%黄爱玲%吕暾
李爽%黃文斌%黃愛玲%呂暾
리상%황문빈%황애령%려돈
犬细小病毒%VP2蛋白%枯草芽孢杆菌
犬細小病毒%VP2蛋白%枯草芽孢桿菌
견세소병독%VP2단백%고초아포간균
从犬细小病毒/犬瘟热二联苗中提取CPV基因组,根据GenBank发表的CPV-VP2基因序列设计一对引物,对VP2基因进行PCR扩增,并克隆至TA Cloning(R) Kit Dual Promoter( pCRⅡ),获得克隆栽体pCRⅡ-VP2.将重组质粒亚克隆到枯草芽孢杆菌表达载体pHT43上,获得重组表达栽体pHT43-VP2.经双酶切鉴定及序列比对分析后,将pHT43-VP2载体转化入枯草芽孢杆菌WB600中进行诱导表达,产物使用PAGE胶蛋白回收法纯化.结果表明,在69 kD处存在目的蛋白,ELISA检测发现,纯化后的目的蛋白与阳性血清存在特异性反应.
從犬細小病毒/犬瘟熱二聯苗中提取CPV基因組,根據GenBank髮錶的CPV-VP2基因序列設計一對引物,對VP2基因進行PCR擴增,併剋隆至TA Cloning(R) Kit Dual Promoter( pCRⅡ),穫得剋隆栽體pCRⅡ-VP2.將重組質粒亞剋隆到枯草芽孢桿菌錶達載體pHT43上,穫得重組錶達栽體pHT43-VP2.經雙酶切鑒定及序列比對分析後,將pHT43-VP2載體轉化入枯草芽孢桿菌WB600中進行誘導錶達,產物使用PAGE膠蛋白迴收法純化.結果錶明,在69 kD處存在目的蛋白,ELISA檢測髮現,純化後的目的蛋白與暘性血清存在特異性反應.
종견세소병독/견온열이련묘중제취CPV기인조,근거GenBank발표적CPV-VP2기인서렬설계일대인물,대VP2기인진행PCR확증,병극륭지TA Cloning(R) Kit Dual Promoter( pCRⅡ),획득극륭재체pCRⅡ-VP2.장중조질립아극륭도고초아포간균표체재체pHT43상,획득중조표체재체pHT43-VP2.경쌍매절감정급서렬비대분석후,장pHT43-VP2재체전화입고초아포간균WB600중진행유도표체,산물사용PAGE효단백회수법순화.결과표명,재69 kD처존재목적단백,ELISA검측발현,순화후적목적단백여양성혈청존재특이성반응.
