CAJ | 학술논문

目的探讨敲低AuroraA基因对替莫唑胺抗人脑胶质瘤U87细胞的作用.方法以慢病毒介导Aurora A shRNA转染高表达AuroraA基因的U87人脑胶质瘤细胞敲低其表达;转染后荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR、Western blot分别检测Aurora-A mRNA及蛋白表达；证实转染成功后,以不同浓度梯度替莫唑胺作用于未转染组、空载体组和转染组3组细胞,每组5个平行孔,并设空白对照及阴性对照,作用一定时间后用CCK8法测定替莫唑胺对细胞增殖影响；流式细胞仪测替莫唑胺对细胞周期的影响.结果荧光显微镜下可见转染组及空载体组细胞带绿色荧光；未转染组、空载体组和转染组的RT-PCR和Western blot结果灰度值分别为(31023±926)、(30124±1074)、(896±172)和(39556±2306)、(39348±2738)、(574±96).相对于空载体组和未转染组,转染组的Aurora A mRNA和蛋白表达均降低(P＜ 0.001)；未转染组、空载体组和转染组的半数有效抑制浓度(IC50)分别为:(43.38±2.15) μmol/L、(43.76±1.52)μmol/L、(22.20±2.34) μmol/L,转染组替莫唑胺半数有效抑制浓度(IG0)降低(P＜0.01)；替莫唑胺处理的转染组G2/M期细胞百分数(88.01％±7.35％)高于空载体组(59.28％±6.76％)和未转染组(58.35％±5.98)(P＜ 0.01),与对照的相同细胞株相比GVM期均延长(P＜0.01).结论敲低AuroraA基因表达可增强替莫唑胺抗人脑胶质瘤U87细胞作用.
목적 탐토고저AuroraA기인대체막서알항인뇌효질류U87세포적작용.방법 이만병독개도Aurora A shRNA전염고표체AuroraA기인적U87인뇌효질류세포고저기표체;전염후형광현미경관찰전염효솔,RT-PCR、Western blot분별검측Aurora-A mRNA급단백표체；증실전염성공후,이불동농도제도체막서알작용우미전염조、공재체조화전염조3조세포,매조5개평행공,병설공백대조급음성대조,작용일정시간후용CCK8법측정체막서알대세포증식영향；류식세포의측체막서알대세포주기적영향.결과 형광현미경하가견전염조급공재체조세포대록색형광；미전염조、공재체조화전염조적RT-PCR화Western blot결과회도치분별위(31023±926)、(30124±1074)、(896±172)화(39556±2306)、(39348±2738)、(574±96).상대우공재체조화미전염조,전염조적Aurora A mRNA화단백표체균강저(P＜ 0.001)；미전염조、공재체조화전염조적반수유효억제농도(IC50)분별위:(43.38±2.15) μmol/L、(43.76±1.52)μmol/L、(22.20±2.34) μmol/L,전염조체막서알반수유효억제농도(IG0)강저(P＜0.01)；체막서알처리적전염조G2/M기세포백분수(88.01％±7.35％)고우공재체조(59.28％±6.76％)화미전염조(58.35％±5.98)(P＜ 0.01),여대조적상동세포주상비GVM기균연장(P＜0.01).결론 고저AuroraA기인표체가증강체막서알항인뇌효질류U87세포작용.