山东大学学报(工学版)
山東大學學報(工學版)
산동대학학보(공학판)
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY OF TECHNOLOGY
2003年
2期
216-220
,共5页
赵友春%王革%孔扬%薛峰%张长铠
趙友春%王革%孔颺%薛峰%張長鎧
조우춘%왕혁%공양%설봉%장장개
组织型纤溶酶原激活剂%克隆表达%分离纯化
組織型纖溶酶原激活劑%剋隆錶達%分離純化
조직형섬용매원격활제%극륭표체%분리순화
从人脑cDNA文库中经PCR扩增得到组织型纤溶酶原激活剂重组变异体(reteplase,简称r-PA,中文名称:瑞替普酶)的cDNA,经测序确证,克隆于表达载体pET22b,转化大肠肝菌BL21进行重组表达.表达的r-PA占菌体总蛋白的40%,以包涵体形式存在.经过亲和层析和离子交换层析等纯化步骤后,得到纯度高于99%,比活性高于5×105*!IU/mg的r-PA.对纯化的r-PA进行了western blot,N端氨基酸序列、氨基酸组成、质谱分析等测定.动物血栓模型实验表明:r-PA具有较好的溶血栓作用.
從人腦cDNA文庫中經PCR擴增得到組織型纖溶酶原激活劑重組變異體(reteplase,簡稱r-PA,中文名稱:瑞替普酶)的cDNA,經測序確證,剋隆于錶達載體pET22b,轉化大腸肝菌BL21進行重組錶達.錶達的r-PA佔菌體總蛋白的40%,以包涵體形式存在.經過親和層析和離子交換層析等純化步驟後,得到純度高于99%,比活性高于5×105*!IU/mg的r-PA.對純化的r-PA進行瞭western blot,N耑氨基痠序列、氨基痠組成、質譜分析等測定.動物血栓模型實驗錶明:r-PA具有較好的溶血栓作用.
종인뇌cDNA문고중경PCR확증득도조직형섬용매원격활제중조변이체(reteplase,간칭r-PA,중문명칭:서체보매)적cDNA,경측서학증,극륭우표체재체pET22b,전화대장간균BL21진행중조표체.표체적r-PA점균체총단백적40%,이포함체형식존재.경과친화층석화리자교환층석등순화보취후,득도순도고우99%,비활성고우5×105*!IU/mg적r-PA.대순화적r-PA진행료western blot,N단안기산서렬、안기산조성、질보분석등측정.동물혈전모형실험표명:r-PA구유교호적용혈전작용.
