生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2004年
2期
163-166
,共4页
何宏轩%秦曦明%张强哲%汤义%刘丽艳%郑昌学%段明星
何宏軒%秦晞明%張彊哲%湯義%劉麗豔%鄭昌學%段明星
하굉헌%진희명%장강철%탕의%류려염%정창학%단명성
禽流感病毒%血凝素基因%RT-PCR%克隆%DNA疫苗
禽流感病毒%血凝素基因%RT-PCR%剋隆%DNA疫苗
금류감병독%혈응소기인%RT-PCR%극륭%DNA역묘
血凝素(HA)是决定禽流感病毒的毒力强弱和免疫原性的主要蛋白质根据已发表的H9亚型AIV的HA基因序列,设计合成了l对H9 HA特异引物,以AIV A/Chicken/Henan/1/1999/(H9N2)核酸为模板,通过RT-PCR扩增出l条1.6 kb cDNA片段.将HA基因插入pVAX1中,构建了真核表达质粒pVAX-H9.采用活体电击法免疫3周龄SPF鸡10只,剂量为50μg/只,3周后加强免疫一次,5周后以100倍鸡胚感染剂量(ElD)的HA基因同源病毒对所有鸡进行攻毒.其间每周检测抗体水平变化,6周后以棉拭子进行泄殖腔病毒分离.结果为攻毒后免疫组鸡HI效价为91og2～101og2,对照组为21og2～41og2;免疫组病毒分离数为0/10,对照组为10/10.表明所构建的HA基因表达质粒可作为基因疫苗诱导鸡产生免疫保护反应.
血凝素(HA)是決定禽流感病毒的毒力彊弱和免疫原性的主要蛋白質根據已髮錶的H9亞型AIV的HA基因序列,設計閤成瞭l對H9 HA特異引物,以AIV A/Chicken/Henan/1/1999/(H9N2)覈痠為模闆,通過RT-PCR擴增齣l條1.6 kb cDNA片段.將HA基因插入pVAX1中,構建瞭真覈錶達質粒pVAX-H9.採用活體電擊法免疫3週齡SPF鷄10隻,劑量為50μg/隻,3週後加彊免疫一次,5週後以100倍鷄胚感染劑量(ElD)的HA基因同源病毒對所有鷄進行攻毒.其間每週檢測抗體水平變化,6週後以棉拭子進行洩殖腔病毒分離.結果為攻毒後免疫組鷄HI效價為91og2～101og2,對照組為21og2～41og2;免疫組病毒分離數為0/10,對照組為10/10.錶明所構建的HA基因錶達質粒可作為基因疫苗誘導鷄產生免疫保護反應.
혈응소(HA)시결정금류감병독적독력강약화면역원성적주요단백질근거이발표적H9아형AIV적HA기인서렬,설계합성료l대H9 HA특이인물,이AIV A/Chicken/Henan/1/1999/(H9N2)핵산위모판,통과RT-PCR확증출l조1.6 kb cDNA편단.장HA기인삽입pVAX1중,구건료진핵표체질립pVAX-H9.채용활체전격법면역3주령SPF계10지,제량위50μg/지,3주후가강면역일차,5주후이100배계배감염제량(ElD)적HA기인동원병독대소유계진행공독.기간매주검측항체수평변화,6주후이면식자진행설식강병독분리.결과위공독후면역조계HI효개위91og2～101og2,대조조위21og2～41og2;면역조병독분리수위0/10,대조조위10/10.표명소구건적HA기인표체질립가작위기인역묘유도계산생면역보호반응.
