四川动物
四川動物
사천동물
SICHUAN JOURNAL OF ZOOLOGY
2006年
3期
473-477
,共5页
蔡振媛%张同作%连新明%慈海鑫%苏建平
蔡振媛%張同作%連新明%慈海鑫%囌建平
채진원%장동작%련신명%자해흠%소건평
野外取样%高原鼠兔%高原鼢鼠%样品保存方法%总DNA提取
野外取樣%高原鼠兔%高原鼢鼠%樣品保存方法%總DNA提取
야외취양%고원서토%고원분서%양품보존방법%총DNA제취
为了确定一种方便的野外动物样品保存方法,以新鲜材料作对照,从-20℃冰箱、70%乙醇、含50 mmol/L EDTA的70%乙醇、95%乙醇、液氮处理的高原鼠肌肉和肝脏组织中提取基因组总DNA.通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计对提取的基因组总DNA质量进行检测.结果显示:相同处理的肝脏DNA产量大,肌肉组织提取的DNA质量好;各种保存方法提取的DNA降解程度依次为,-20 ℃冰箱、70%乙醇＞含50 mmol/L EDTA的70%乙醇、95%乙醇＞液氮＞新鲜.选择新鲜肌肉和95%酒精处理的肌肉样品提取的总DNA作模板,进行微卫星PCR扩增,均可获得清晰的电泳带.将该方法用于高原鼢鼠,进行线粒体12S rRNA、Cyt b和D-loop区测序,结果显示该方法保存的样品与新鲜样品没有差别.因此,在野外用95%乙醇固定肌肉样品是一种可行的样品保存方法.
為瞭確定一種方便的野外動物樣品保存方法,以新鮮材料作對照,從-20℃冰箱、70%乙醇、含50 mmol/L EDTA的70%乙醇、95%乙醇、液氮處理的高原鼠肌肉和肝髒組織中提取基因組總DNA.通過瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計對提取的基因組總DNA質量進行檢測.結果顯示:相同處理的肝髒DNA產量大,肌肉組織提取的DNA質量好;各種保存方法提取的DNA降解程度依次為,-20 ℃冰箱、70%乙醇＞含50 mmol/L EDTA的70%乙醇、95%乙醇＞液氮＞新鮮.選擇新鮮肌肉和95%酒精處理的肌肉樣品提取的總DNA作模闆,進行微衛星PCR擴增,均可穫得清晰的電泳帶.將該方法用于高原鼢鼠,進行線粒體12S rRNA、Cyt b和D-loop區測序,結果顯示該方法保存的樣品與新鮮樣品沒有差彆.因此,在野外用95%乙醇固定肌肉樣品是一種可行的樣品保存方法.
위료학정일충방편적야외동물양품보존방법,이신선재료작대조,종-20℃빙상、70%을순、함50 mmol/L EDTA적70%을순、95%을순、액담처리적고원서기육화간장조직중제취기인조총DNA.통과경지당응효전영화자외분광광도계대제취적기인조총DNA질량진행검측.결과현시:상동처리적간장DNA산량대,기육조직제취적DNA질량호;각충보존방법제취적DNA강해정도의차위,-20 ℃빙상、70%을순＞함50 mmol/L EDTA적70%을순、95%을순＞액담＞신선.선택신선기육화95%주정처리적기육양품제취적총DNA작모판,진행미위성PCR확증,균가획득청석적전영대.장해방법용우고원분서,진행선립체12S rRNA、Cyt b화D-loop구측서,결과현시해방법보존적양품여신선양품몰유차별.인차,재야외용95%을순고정기육양품시일충가행적양품보존방법.
