西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2007年
4期
376-379,398
,共5页
付慧%楚雍烈%张丽莉%曹美茹%成凡%茹小荣%王勇健
付慧%楚雍烈%張麗莉%曹美茹%成凡%茹小榮%王勇健
부혜%초옹렬%장려리%조미여%성범%여소영%왕용건
丙型肝炎病毒%ns5a基因%基因表达
丙型肝炎病毒%ns5a基因%基因錶達
병형간염병독%ns5a기인%기인표체
目的 克隆和表达丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因.方法 运用原核细胞基因工程技术.设计目的 基因的特异引物,采用巢式PCR法,从含HCV 1b DY株全长cDNA的质粒HCV17中扩增出约480 bp的目的 片段,将其插入克隆载体pMD18-Tvector中,再亚克隆到原核表达载体pET-28a中;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达;采用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测NS5A蛋白的表达水平.结果 成功构建了含有HCV1b DY株ns5a基因的重组体,并得以表达.结论 成功构建和表达了HCV1b DY株ns5a基因,为进一步研究HCVns5a的基因型及探讨该基因编码的NS5A蛋白的性质和生物学活性创造了条件.
目的 剋隆和錶達丙型肝炎病毒(HCV)1b型地方株DY株ns5a基因.方法 運用原覈細胞基因工程技術.設計目的 基因的特異引物,採用巢式PCR法,從含HCV 1b DY株全長cDNA的質粒HCV17中擴增齣約480 bp的目的 片段,將其插入剋隆載體pMD18-Tvector中,再亞剋隆到原覈錶達載體pET-28a中;經酶切、PCR及測序鑒定後轉化入BL21菌株,在IPTG誘導下進行融閤蛋白的錶達;採用SDS-PAGE電泳及Western-blot檢測NS5A蛋白的錶達水平.結果 成功構建瞭含有HCV1b DY株ns5a基因的重組體,併得以錶達.結論 成功構建和錶達瞭HCV1b DY株ns5a基因,為進一步研究HCVns5a的基因型及探討該基因編碼的NS5A蛋白的性質和生物學活性創造瞭條件.
목적 극륭화표체병형간염병독(HCV)1b형지방주DY주ns5a기인.방법 운용원핵세포기인공정기술.설계목적 기인적특이인물,채용소식PCR법,종함HCV 1b DY주전장cDNA적질립HCV17중확증출약480 bp적목적 편단,장기삽입극륭재체pMD18-Tvector중,재아극륭도원핵표체재체pET-28a중;경매절、PCR급측서감정후전화입BL21균주,재IPTG유도하진행융합단백적표체;채용SDS-PAGE전영급Western-blot검측NS5A단백적표체수평.결과 성공구건료함유HCV1b DY주ns5a기인적중조체,병득이표체.결론 성공구건화표체료HCV1b DY주ns5a기인,위진일보연구HCVns5a적기인형급탐토해기인편마적NS5A단백적성질화생물학활성창조료조건.
