解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2009年
2期
240-245
,共6页
张晓丽%高英茂%赵舒武%邴鲁军
張曉麗%高英茂%趙舒武%邴魯軍
장효려%고영무%조서무%병로군
支持细胞%精原细胞%饲养层%共培养%小鼠
支持細胞%精原細胞%飼養層%共培養%小鼠
지지세포%정원세포%사양층%공배양%소서
目的 分离、纯化、培养小鼠睾丸支持细胞,通过与精原细胞共培养,研究体外培养的支持细胞对精原细胞的影响.方法 用复合酶消化、密度梯度离心和差异贴壁法分离、纯化、培养新生小鼠睾丸支持细胞,以苏丹Ⅳ染色鉴定支持细胞;用丝裂霉素-C处理支持细胞后作为饲养层,与精原细胞共培养;以直接分离培养的精原细胞作对照.倒置相差显微镜观察,细胞培养第3天,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定精原细胞的增殖率;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/磷脂酰肌醇(ANNEXIN-V-FITC/PI)染色;激光扫描共焦显微镜观察记录精原细胞的凋亡率,比较精原细胞克隆大小、存活时间、增殖率和凋亡率的不同. 结果 分离、纯化后经苏丹Ⅳ染色鉴定的小鼠支持细胞纯度可达95%以上,与支持细胞共培养的精原细胞的克隆大小、存活时间和细胞增殖率明显高于对照组,而凋亡鲻率则明显低于对照组.结论支持细胞可以促进精原细胞的增殖,抑制其凋亡.
目的 分離、純化、培養小鼠睪汍支持細胞,通過與精原細胞共培養,研究體外培養的支持細胞對精原細胞的影響.方法 用複閤酶消化、密度梯度離心和差異貼壁法分離、純化、培養新生小鼠睪汍支持細胞,以囌丹Ⅳ染色鑒定支持細胞;用絲裂黴素-C處理支持細胞後作為飼養層,與精原細胞共培養;以直接分離培養的精原細胞作對照.倒置相差顯微鏡觀察,細胞培養第3天,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測定精原細胞的增殖率;膜聯蛋白V-異硫氰痠熒光素/燐脂酰肌醇(ANNEXIN-V-FITC/PI)染色;激光掃描共焦顯微鏡觀察記錄精原細胞的凋亡率,比較精原細胞剋隆大小、存活時間、增殖率和凋亡率的不同. 結果 分離、純化後經囌丹Ⅳ染色鑒定的小鼠支持細胞純度可達95%以上,與支持細胞共培養的精原細胞的剋隆大小、存活時間和細胞增殖率明顯高于對照組,而凋亡鯔率則明顯低于對照組.結論支持細胞可以促進精原細胞的增殖,抑製其凋亡.
목적 분리、순화、배양소서고환지지세포,통과여정원세포공배양,연구체외배양적지지세포대정원세포적영향.방법 용복합매소화、밀도제도리심화차이첩벽법분리、순화、배양신생소서고환지지세포,이소단Ⅳ염색감정지지세포;용사렬매소-C처리지지세포후작위사양층,여정원세포공배양;이직접분리배양적정원세포작대조.도치상차현미경관찰,세포배양제3천,사갑기우담서염(MTT)법측정정원세포적증식솔;막련단백V-이류청산형광소/린지선기순(ANNEXIN-V-FITC/PI)염색;격광소묘공초현미경관찰기록정원세포적조망솔,비교정원세포극륭대소、존활시간、증식솔화조망솔적불동. 결과 분리、순화후경소단Ⅳ염색감정적소서지지세포순도가체95%이상,여지지세포공배양적정원세포적극륭대소、존활시간화세포증식솔명현고우대조조,이조망치솔칙명현저우대조조.결론지지세포가이촉진정원세포적증식,억제기조망.
