基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2011年
8期
922-927
,共6页
BMP4%siRNA%腺病毒%乳腺癌%骨转移
BMP4%siRNA%腺病毒%乳腺癌%骨轉移
BMP4%siRNA%선병독%유선암%골전이
目的 构建靶向抑制骨形态发生蛋白BMP4基因RNA的siRNA腺病毒,为进一步研究其在乳腺癌骨转移中的作用打下基础.方法 以PCR扩增获得BMP4全长片段,插入筛选质粒pSOS载体,同时设计6段靶向BMP4基因RNA的干扰片段,分别经酶切、连接及鉴定后获得pSOS-sirBMP4.脂质体转染293细胞,根据荧光表达量筛选获得干扰效率较高的4个干扰片段,插入穿梭质粒pSES-HUS,经重组、HEK-293细胞包装获得BMP4-siRNA腺病毒.感染乳腺癌细胞系MDA-MB-231,RT-PCR、Western blot检测其干扰效率.MTr法检测其对MDA-MB-231细胞增殖的影响.结果 筛选获得4个干扰效率较高的片段,插入穿梭质粒,经重组、包装获得腺病毒pAd-sirBMP4.感染乳腺癌细胞系MDA-MB-231后,明显抑制BMP4的表达并促进MDA-MB-231细胞增殖.结论 成功构建具有较高干扰效率的腺病毒pAd-sirBMP4,为进一步研究BMP4在乳腺癌中的作用打下基础.
目的 構建靶嚮抑製骨形態髮生蛋白BMP4基因RNA的siRNA腺病毒,為進一步研究其在乳腺癌骨轉移中的作用打下基礎.方法 以PCR擴增穫得BMP4全長片段,插入篩選質粒pSOS載體,同時設計6段靶嚮BMP4基因RNA的榦擾片段,分彆經酶切、連接及鑒定後穫得pSOS-sirBMP4.脂質體轉染293細胞,根據熒光錶達量篩選穫得榦擾效率較高的4箇榦擾片段,插入穿梭質粒pSES-HUS,經重組、HEK-293細胞包裝穫得BMP4-siRNA腺病毒.感染乳腺癌細胞繫MDA-MB-231,RT-PCR、Western blot檢測其榦擾效率.MTr法檢測其對MDA-MB-231細胞增殖的影響.結果 篩選穫得4箇榦擾效率較高的片段,插入穿梭質粒,經重組、包裝穫得腺病毒pAd-sirBMP4.感染乳腺癌細胞繫MDA-MB-231後,明顯抑製BMP4的錶達併促進MDA-MB-231細胞增殖.結論 成功構建具有較高榦擾效率的腺病毒pAd-sirBMP4,為進一步研究BMP4在乳腺癌中的作用打下基礎.
목적 구건파향억제골형태발생단백BMP4기인RNA적siRNA선병독,위진일보연구기재유선암골전이중적작용타하기출.방법 이PCR확증획득BMP4전장편단,삽입사선질립pSOS재체,동시설계6단파향BMP4기인RNA적간우편단,분별경매절、련접급감정후획득pSOS-sirBMP4.지질체전염293세포,근거형광표체량사선획득간우효솔교고적4개간우편단,삽입천사질립pSES-HUS,경중조、HEK-293세포포장획득BMP4-siRNA선병독.감염유선암세포계MDA-MB-231,RT-PCR、Western blot검측기간우효솔.MTr법검측기대MDA-MB-231세포증식적영향.결과 사선획득4개간우효솔교고적편단,삽입천사질립,경중조、포장획득선병독pAd-sirBMP4.감염유선암세포계MDA-MB-231후,명현억제BMP4적표체병촉진MDA-MB-231세포증식.결론 성공구건구유교고간우효솔적선병독pAd-sirBMP4,위진일보연구BMP4재유선암중적작용타하기출.
