河南大学学报(自然科学版)
河南大學學報(自然科學版)
하남대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF HENAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2011年
5期
500-504
,共5页
张瑶楠%石冲%马永超%王泽生%张玉祥
張瑤楠%石遲%馬永超%王澤生%張玉祥
장요남%석충%마영초%왕택생%장옥상
Src%SH3%SH2%KD%真核表达载体
Src%SH3%SH2%KD%真覈錶達載體
Src%SH3%SH2%KD%진핵표체재체
通过聚合酶链式反应(PCR),将c-Src的三个结构域SH3、SH2和KD分别定向克隆至C端带有HA蛋白标签序列的真核表达载体pcDNA3中.经HindIII和XbaI双酶切分析和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞48 h,蛋白免疫印迹法可以检测到细胞内SH3、SH2和KD的表达,证明重组表达质粒pcDNA3-SH2、pcDNA3-SH3和pcDNA3-KD构建成功,为进一步研究Src激酶在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础.
通過聚閤酶鏈式反應(PCR),將c-Src的三箇結構域SH3、SH2和KD分彆定嚮剋隆至C耑帶有HA蛋白標籤序列的真覈錶達載體pcDNA3中.經HindIII和XbaI雙酶切分析和測序鑒定正確後,應用脂質體法轉染HeLa細胞48 h,蛋白免疫印跡法可以檢測到細胞內SH3、SH2和KD的錶達,證明重組錶達質粒pcDNA3-SH2、pcDNA3-SH3和pcDNA3-KD構建成功,為進一步研究Src激酶在腫瘤髮生髮展中的作用奠定瞭基礎.
통과취합매련식반응(PCR),장c-Src적삼개결구역SH3、SH2화KD분별정향극륭지C단대유HA단백표첨서렬적진핵표체재체pcDNA3중.경HindIII화XbaI쌍매절분석화측서감정정학후,응용지질체법전염HeLa세포48 h,단백면역인적법가이검측도세포내SH3、SH2화KD적표체,증명중조표체질립pcDNA3-SH2、pcDNA3-SH3화pcDNA3-KD구건성공,위진일보연구Src격매재종류발생발전중적작용전정료기출.
