中国医药导报
中國醫藥導報
중국의약도보
CHINA MEDICAL HERALD
2012年
1期
28-29,66
,共3页
李军%黄霞%姚雪梅%陈雪芬%齐兴柱
李軍%黃霞%姚雪梅%陳雪芬%齊興柱
리군%황하%요설매%진설분%제흥주
碱性磷酸酶%大肠杆菌DH10B%表达纯化%活性分析
堿性燐痠酶%大腸桿菌DH10B%錶達純化%活性分析
감성린산매%대장간균DH10B%표체순화%활성분석
目的:克隆并表达E.coli DH10B碱性磷酸酶(AKP)成熟肽基因(phoAm),为AKP的定向改构及应用奠定基础.方法:采用PCR法从E.coli DH10B基因组扩增phoAm;将phoAm克隆入表达载体pET28a,再转入E.coli BL21(DE3)进行表达;用免疫金层析法和SDS-PAGE法检测表达的重组rAKP;采用对硝基酚磷酸(pNPP)法测定rAKP的活性.结果:rAKP单体分子量约47 K,活性分析比对照菌提高21.5倍.结论:获得AKP成熟肽基因并得了到具有较高活性的重组rAKP.
目的:剋隆併錶達E.coli DH10B堿性燐痠酶(AKP)成熟肽基因(phoAm),為AKP的定嚮改構及應用奠定基礎.方法:採用PCR法從E.coli DH10B基因組擴增phoAm;將phoAm剋隆入錶達載體pET28a,再轉入E.coli BL21(DE3)進行錶達;用免疫金層析法和SDS-PAGE法檢測錶達的重組rAKP;採用對硝基酚燐痠(pNPP)法測定rAKP的活性.結果:rAKP單體分子量約47 K,活性分析比對照菌提高21.5倍.結論:穫得AKP成熟肽基因併得瞭到具有較高活性的重組rAKP.
목적:극륭병표체E.coli DH10B감성린산매(AKP)성숙태기인(phoAm),위AKP적정향개구급응용전정기출.방법:채용PCR법종E.coli DH10B기인조확증phoAm;장phoAm극륭입표체재체pET28a,재전입E.coli BL21(DE3)진행표체;용면역금층석법화SDS-PAGE법검측표체적중조rAKP;채용대초기분린산(pNPP)법측정rAKP적활성.결과:rAKP단체분자량약47 K,활성분석비대조균제고21.5배.결론:획득AKP성숙태기인병득료도구유교고활성적중조rAKP.
