中国药物与临床
中國藥物與臨床
중국약물여림상
CHINESE REMEDIES & CLINICS
2004年
2期
99-104
,共6页
李孟森%陈倩%李平风%杜国光%李刚%马秋玲
李孟森%陳倩%李平風%杜國光%李剛%馬鞦玲
리맹삼%진천%리평풍%두국광%리강%마추령
甲胎蛋白类%信号转导%肿瘤%受体%细胞增生
甲胎蛋白類%信號轉導%腫瘤%受體%細胞增生
갑태단백류%신호전도%종류%수체%세포증생
目的观察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)促肿瘤细胞增生的信号转导方式.方法从人脐带血清中提取的AFP,作用于体外培养的NIH3T3细胞,用噻唑蓝(MTT)染色计数法,3H-脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法等指标检测细胞增生状况;再用放射免疫结合法分析在百日咳毒素(pertussis toxin,PTFX)预处理前后AFP对细胞内环腺苷酸(cAMP)浓度、细胞内蛋白激酶A(protein kinaseA,PKA)活性变化和共聚焦显微镜扫描细胞内钙离子(Ca2+)浓度,以及Western blot分析p21ras蛋白的表达.结果AFP 10-80 mg/L作用24 h后,对NIH3T3细胞有不同程度的促增生作用;AFP能显著提高NIH3T3细胞内的cAMP浓度、PKA活性和Ca2+浓度,对p21ras的表达也有明显的促进作用;PTX能阻断AFP对NIH3T3细胞内的cAMP浓度和PKA活性的影响,而对AFP提高NIH3T3细胞Ca2+浓度、p21ras的表达则没有明显的阻断作用.抗AFP的单克隆抗体也能阻断AFP的作用.结论AFP具有促NIH3T3细胞增生的作用,AFP受体通过cAMP-PKA、Ca2+等多信号转导途径调节NIH3T3细胞生长.
目的觀察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)促腫瘤細胞增生的信號轉導方式.方法從人臍帶血清中提取的AFP,作用于體外培養的NIH3T3細胞,用噻唑藍(MTT)染色計數法,3H-脫氧胸腺嘧啶覈苷(3H-TdR)摻入法等指標檢測細胞增生狀況;再用放射免疫結閤法分析在百日咳毒素(pertussis toxin,PTFX)預處理前後AFP對細胞內環腺苷痠(cAMP)濃度、細胞內蛋白激酶A(protein kinaseA,PKA)活性變化和共聚焦顯微鏡掃描細胞內鈣離子(Ca2+)濃度,以及Western blot分析p21ras蛋白的錶達.結果AFP 10-80 mg/L作用24 h後,對NIH3T3細胞有不同程度的促增生作用;AFP能顯著提高NIH3T3細胞內的cAMP濃度、PKA活性和Ca2+濃度,對p21ras的錶達也有明顯的促進作用;PTX能阻斷AFP對NIH3T3細胞內的cAMP濃度和PKA活性的影響,而對AFP提高NIH3T3細胞Ca2+濃度、p21ras的錶達則沒有明顯的阻斷作用.抗AFP的單剋隆抗體也能阻斷AFP的作用.結論AFP具有促NIH3T3細胞增生的作用,AFP受體通過cAMP-PKA、Ca2+等多信號轉導途徑調節NIH3T3細胞生長.
목적관찰갑태단백(alpha-fetoprotein,AFP)촉종류세포증생적신호전도방식.방법종인제대혈청중제취적AFP,작용우체외배양적NIH3T3세포,용새서람(MTT)염색계수법,3H-탈양흉선밀정핵감(3H-TdR)참입법등지표검측세포증생상황;재용방사면역결합법분석재백일해독소(pertussis toxin,PTFX)예처리전후AFP대세포내배선감산(cAMP)농도、세포내단백격매A(protein kinaseA,PKA)활성변화화공취초현미경소묘세포내개리자(Ca2+)농도,이급Western blot분석p21ras단백적표체.결과AFP 10-80 mg/L작용24 h후,대NIH3T3세포유불동정도적촉증생작용;AFP능현저제고NIH3T3세포내적cAMP농도、PKA활성화Ca2+농도,대p21ras적표체야유명현적촉진작용;PTX능조단AFP대NIH3T3세포내적cAMP농도화PKA활성적영향,이대AFP제고NIH3T3세포Ca2+농도、p21ras적표체칙몰유명현적조단작용.항AFP적단극륭항체야능조단AFP적작용.결론AFP구유촉NIH3T3세포증생적작용,AFP수체통과cAMP-PKA、Ca2+등다신호전도도경조절NIH3T3세포생장.
