高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2004年
6期
23-27
,共5页
江世贵%张殿昌%苏天凤%周发林%吕俊霖
江世貴%張殿昌%囌天鳳%週髮林%呂俊霖
강세귀%장전창%소천봉%주발림%려준림
鲮%生长激素%分子克隆%促生长活性
鯪%生長激素%分子剋隆%促生長活性
릉%생장격소%분자극륭%촉생장활성
利用RT-PCR技术从鲮脑垂体组织中克隆出生长激素cDNA 片段,克隆的mcGH全长567bp,编码由188个氨基酸残基组成的GH成熟肽.构建了表达载体pQE30-mcGH,转化大肠杆菌M15(pREP4),在初步优化发酵条件的基础上实现了鲮mcGH在大肠杆菌中的高效表达,表达的重组蛋白占菌体总蛋白的32.13%,经western blotting分析证实所表达的重组蛋白是mcGH.表达产物主要以包涵体的形式存在.重组蛋白变性、复性后,经Ni-chelating Sepharose亲和层析纯化,SDS-PAGE显示,纯化的mcGH纯度约为94%.纯化的mcGH腹腔注射莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus),经4周处理后,实验组1和2的体长增长率分别比对照组快9.38%和9.75%,体重增长率分别快23.42%和62.48%.经t检验统计分析表明,表达的重组mcGH具有显著的促罗非鱼生长作用(P＜0.05).
利用RT-PCR技術從鯪腦垂體組織中剋隆齣生長激素cDNA 片段,剋隆的mcGH全長567bp,編碼由188箇氨基痠殘基組成的GH成熟肽.構建瞭錶達載體pQE30-mcGH,轉化大腸桿菌M15(pREP4),在初步優化髮酵條件的基礎上實現瞭鯪mcGH在大腸桿菌中的高效錶達,錶達的重組蛋白佔菌體總蛋白的32.13%,經western blotting分析證實所錶達的重組蛋白是mcGH.錶達產物主要以包涵體的形式存在.重組蛋白變性、複性後,經Ni-chelating Sepharose親和層析純化,SDS-PAGE顯示,純化的mcGH純度約為94%.純化的mcGH腹腔註射莫桑比剋囉非魚(Oreochromis mossambicus),經4週處理後,實驗組1和2的體長增長率分彆比對照組快9.38%和9.75%,體重增長率分彆快23.42%和62.48%.經t檢驗統計分析錶明,錶達的重組mcGH具有顯著的促囉非魚生長作用(P＜0.05).
이용RT-PCR기술종릉뇌수체조직중극륭출생장격소cDNA 편단,극륭적mcGH전장567bp,편마유188개안기산잔기조성적GH성숙태.구건료표체재체pQE30-mcGH,전화대장간균M15(pREP4),재초보우화발효조건적기출상실현료릉mcGH재대장간균중적고효표체,표체적중조단백점균체총단백적32.13%,경western blotting분석증실소표체적중조단백시mcGH.표체산물주요이포함체적형식존재.중조단백변성、복성후,경Ni-chelating Sepharose친화층석순화,SDS-PAGE현시,순화적mcGH순도약위94%.순화적mcGH복강주사막상비극라비어(Oreochromis mossambicus),경4주처리후,실험조1화2적체장증장솔분별비대조조쾌9.38%화9.75%,체중증장솔분별쾌23.42%화62.48%.경t검험통계분석표명,표체적중조mcGH구유현저적촉라비어생장작용(P＜0.05).
