军医进修学院学报
軍醫進脩學院學報
군의진수학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL
2010年
10期
1019-1022
,共4页
陈钰%郭业磊%钟江%张世仑
陳鈺%郭業磊%鐘江%張世崙
진옥%곽업뢰%종강%장세륜
CD8+NKT细胞%小鼠%葡萄球菌肠毒素B%免疫耐受
CD8+NKT細胞%小鼠%葡萄毬菌腸毒素B%免疫耐受
CD8+NKT세포%소서%포도구균장독소B%면역내수
目的 研究体外扩增小鼠CD8+NK1.1+NKT细胞的表面分子标志、分化途径及细胞属性.方法 获取超抗原SEB活化后体外扩增的小鼠效应细胞,用抗CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE、NK1.1-APC、TcRV β8-FITC和CD69-FITC荧光抗体染色后,用流式细胞仪(FCM Calibue BD,USA)鉴定CD8+NK1.1+NKT细胞的表面分子标志和分化途径.用逆转录聚合酶链反应测定细胞内各种细胞因子和Foxp3基因转录水平.结果 体外扩增的细胞中91.92%是CD8+T细胞,其中22.75%的细胞是CD8+NN1.1+NKT细胞,高于正常值(0.21±0.19,n=12)108倍以上.19.61%NKT细胞是TcRV β 8+NN1.1+NKT细胞.CD69分子的表达由原始0.11%增加到85.95%.CD4+T、CD3T细胞亚群和CD4+NKT、CD3+NKT及CD4-CD8-NKT细胞亚群没有增加.扩增细胞TGF-β的mRNA表达呈阳性,不表达Foxp3和细胞因子IL-2、4、5、6、10及IFN-γ.CD8+NKT细胞直接由CD8+T细胞分化而来.结论 CD8+NK1.1+NKT细胞的分子特征为CD69+Foxp3-TcRV β 8+TGF-β+CD8+NK1.1+;它们既不是CD8+T调节细胞(Treg.),也不是CD4+NKT细胞,直接由CD8+T细胞分化而来,带有TCRV β 8受体,应属于T细胞亚群.
目的 研究體外擴增小鼠CD8+NK1.1+NKT細胞的錶麵分子標誌、分化途徑及細胞屬性.方法 穫取超抗原SEB活化後體外擴增的小鼠效應細胞,用抗CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE、NK1.1-APC、TcRV β8-FITC和CD69-FITC熒光抗體染色後,用流式細胞儀(FCM Calibue BD,USA)鑒定CD8+NK1.1+NKT細胞的錶麵分子標誌和分化途徑.用逆轉錄聚閤酶鏈反應測定細胞內各種細胞因子和Foxp3基因轉錄水平.結果 體外擴增的細胞中91.92%是CD8+T細胞,其中22.75%的細胞是CD8+NN1.1+NKT細胞,高于正常值(0.21±0.19,n=12)108倍以上.19.61%NKT細胞是TcRV β 8+NN1.1+NKT細胞.CD69分子的錶達由原始0.11%增加到85.95%.CD4+T、CD3T細胞亞群和CD4+NKT、CD3+NKT及CD4-CD8-NKT細胞亞群沒有增加.擴增細胞TGF-β的mRNA錶達呈暘性,不錶達Foxp3和細胞因子IL-2、4、5、6、10及IFN-γ.CD8+NKT細胞直接由CD8+T細胞分化而來.結論 CD8+NK1.1+NKT細胞的分子特徵為CD69+Foxp3-TcRV β 8+TGF-β+CD8+NK1.1+;它們既不是CD8+T調節細胞(Treg.),也不是CD4+NKT細胞,直接由CD8+T細胞分化而來,帶有TCRV β 8受體,應屬于T細胞亞群.
목적 연구체외확증소서CD8+NK1.1+NKT세포적표면분자표지、분화도경급세포속성.방법 획취초항원SEB활화후체외확증적소서효응세포,용항CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE、NK1.1-APC、TcRV β8-FITC화CD69-FITC형광항체염색후,용류식세포의(FCM Calibue BD,USA)감정CD8+NK1.1+NKT세포적표면분자표지화분화도경.용역전록취합매련반응측정세포내각충세포인자화Foxp3기인전록수평.결과 체외확증적세포중91.92%시CD8+T세포,기중22.75%적세포시CD8+NN1.1+NKT세포,고우정상치(0.21±0.19,n=12)108배이상.19.61%NKT세포시TcRV β 8+NN1.1+NKT세포.CD69분자적표체유원시0.11%증가도85.95%.CD4+T、CD3T세포아군화CD4+NKT、CD3+NKT급CD4-CD8-NKT세포아군몰유증가.확증세포TGF-β적mRNA표체정양성,불표체Foxp3화세포인자IL-2、4、5、6、10급IFN-γ.CD8+NKT세포직접유CD8+T세포분화이래.결론 CD8+NK1.1+NKT세포적분자특정위CD69+Foxp3-TcRV β 8+TGF-β+CD8+NK1.1+;타문기불시CD8+T조절세포(Treg.),야불시CD4+NKT세포,직접유CD8+T세포분화이래,대유TCRV β 8수체,응속우T세포아군.
