中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2007年
1期
78-81
,共4页
邵彬%聂青和%王平忠%李光玉%张亚飞%苟艳子
邵彬%聶青和%王平忠%李光玉%張亞飛%茍豔子
소빈%섭청화%왕평충%리광옥%장아비%구염자
基质金属蛋白酶组织抑制剂-1%酶联免疫吸附法%血清学诊断%肝纤维化
基質金屬蛋白酶組織抑製劑-1%酶聯免疫吸附法%血清學診斷%肝纖維化
기질금속단백매조직억제제-1%매련면역흡부법%혈청학진단%간섬유화
目的 建立一种检测人血清中基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的酶联免疫吸附方法(ELISA),用于血清学诊断人肝纤维化病程进展.方法 以抗人TIMP-1单克隆抗体(McAb)为包被抗体,15%小牛血清为封闭液,和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗TIMP-1 McAb作为标记抗体建立检测人血清TIMP-1 ELISA法.并用于临床初步检测408例肝病患者血清.结果 实验理想的包被抗体浓度为1 μg/ml,血清稀释倍数1:100,HRP标抗体的最佳工作浓度1:400.该法具有良好的重复性,灵敏度达3 ng/ml,中和抑制率在85%以上,稳定性能好,与国外TIMP-1 ELISA试剂盒进行对比试验,表明两种检测方法有良好的相关性(Y=0.0085+0.9892X,r=0.988).临床检测表明TIMP-1随着病损纤维化程度加重而升高,与正常人血清TIMP-1水平相比差异显著(P＜0.01).结论 该法可用于肝纤维化进展定量血清学诊断.同时对影响因素的判定进行了初步的摸索研究,结果可靠.为国内TIMPs诊断试剂盒的研制和开发提供了科学实验依据.
目的 建立一種檢測人血清中基質金屬蛋白酶組織抑製劑-1(TIMP-1)的酶聯免疫吸附方法(ELISA),用于血清學診斷人肝纖維化病程進展.方法 以抗人TIMP-1單剋隆抗體(McAb)為包被抗體,15%小牛血清為封閉液,和辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗TIMP-1 McAb作為標記抗體建立檢測人血清TIMP-1 ELISA法.併用于臨床初步檢測408例肝病患者血清.結果 實驗理想的包被抗體濃度為1 μg/ml,血清稀釋倍數1:100,HRP標抗體的最佳工作濃度1:400.該法具有良好的重複性,靈敏度達3 ng/ml,中和抑製率在85%以上,穩定性能好,與國外TIMP-1 ELISA試劑盒進行對比試驗,錶明兩種檢測方法有良好的相關性(Y=0.0085+0.9892X,r=0.988).臨床檢測錶明TIMP-1隨著病損纖維化程度加重而升高,與正常人血清TIMP-1水平相比差異顯著(P＜0.01).結論 該法可用于肝纖維化進展定量血清學診斷.同時對影響因素的判定進行瞭初步的摸索研究,結果可靠.為國內TIMPs診斷試劑盒的研製和開髮提供瞭科學實驗依據.
목적 건립일충검측인혈청중기질금속단백매조직억제제-1(TIMP-1)적매련면역흡부방법(ELISA),용우혈청학진단인간섬유화병정진전.방법 이항인TIMP-1단극륭항체(McAb)위포피항체,15%소우혈청위봉폐액,화랄근과양화물매(HRP)표기적항TIMP-1 McAb작위표기항체건립검측인혈청TIMP-1 ELISA법.병용우림상초보검측408례간병환자혈청.결과 실험이상적포피항체농도위1 μg/ml,혈청희석배수1:100,HRP표항체적최가공작농도1:400.해법구유량호적중복성,령민도체3 ng/ml,중화억제솔재85%이상,은정성능호,여국외TIMP-1 ELISA시제합진행대비시험,표명량충검측방법유량호적상관성(Y=0.0085+0.9892X,r=0.988).림상검측표명TIMP-1수착병손섬유화정도가중이승고,여정상인혈청TIMP-1수평상비차이현저(P＜0.01).결론 해법가용우간섬유화진전정량혈청학진단.동시대영향인소적판정진행료초보적모색연구,결과가고.위국내TIMPs진단시제합적연제화개발제공료과학실험의거.
