热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2007年
6期
539-542
,共4页
江莉%冯正%许学年%薛海筹%冯宇
江莉%馮正%許學年%薛海籌%馮宇
강리%풍정%허학년%설해주%풍우
细粒棘球蚴%AgB亚单位抗原%基因克隆%表达系统
細粒棘毬蚴%AgB亞單位抗原%基因剋隆%錶達繫統
세립극구유%AgB아단위항원%기인극륭%표체계통
目的 从我国细粒棘球绦虫分离株(新疆源和甘肃源)中克隆AgB1和AgB2两个亚单位基因,并试用不同的表达载体对两个AgB亚单位基因的表达情况进行比较观察.方法 设计特异性引物,扩增AgB1和AgB2亚单位抗原基因,分别用pET28a(+)、pET32a(+)和pGEX4T-13种表达载体构建重组质粒,对AgB亚单位基因在不同载体中的表达情况进行比较.结果 从我国细粒棘球绦虫分离株中克隆的AgB1和AgB2抗原基因与GenBank中的序列比对,AgB1与德国人源、巴西羊源、意大利牛源均有一定的核苷酸和氨基酸差异;AgB2与乌拉圭羊源序列完全一致.在3种载体中表达重组蛋白的结果显示,不同载体和表达系统对重组表达蛋白的生物活性和可溶性有较大的影响.结论 成功地克隆了细粒棘球蚴AgB亚单位基因,AgB1和AgB2基因在3种不同表达载体中的表达情况及对融合标签蛋白的血清基础反应性的比较分析表明,两个重组抗原在pET32a载体中的表达优于pET28a和pGEX4T-1载体.
目的 從我國細粒棘毬縚蟲分離株(新疆源和甘肅源)中剋隆AgB1和AgB2兩箇亞單位基因,併試用不同的錶達載體對兩箇AgB亞單位基因的錶達情況進行比較觀察.方法 設計特異性引物,擴增AgB1和AgB2亞單位抗原基因,分彆用pET28a(+)、pET32a(+)和pGEX4T-13種錶達載體構建重組質粒,對AgB亞單位基因在不同載體中的錶達情況進行比較.結果 從我國細粒棘毬縚蟲分離株中剋隆的AgB1和AgB2抗原基因與GenBank中的序列比對,AgB1與德國人源、巴西羊源、意大利牛源均有一定的覈苷痠和氨基痠差異;AgB2與烏拉圭羊源序列完全一緻.在3種載體中錶達重組蛋白的結果顯示,不同載體和錶達繫統對重組錶達蛋白的生物活性和可溶性有較大的影響.結論 成功地剋隆瞭細粒棘毬蚴AgB亞單位基因,AgB1和AgB2基因在3種不同錶達載體中的錶達情況及對融閤標籤蛋白的血清基礎反應性的比較分析錶明,兩箇重組抗原在pET32a載體中的錶達優于pET28a和pGEX4T-1載體.
목적 종아국세립극구조충분리주(신강원화감숙원)중극륭AgB1화AgB2량개아단위기인,병시용불동적표체재체대량개AgB아단위기인적표체정황진행비교관찰.방법 설계특이성인물,확증AgB1화AgB2아단위항원기인,분별용pET28a(+)、pET32a(+)화pGEX4T-13충표체재체구건중조질립,대AgB아단위기인재불동재체중적표체정황진행비교.결과 종아국세립극구조충분리주중극륭적AgB1화AgB2항원기인여GenBank중적서렬비대,AgB1여덕국인원、파서양원、의대리우원균유일정적핵감산화안기산차이;AgB2여오랍규양원서렬완전일치.재3충재체중표체중조단백적결과현시,불동재체화표체계통대중조표체단백적생물활성화가용성유교대적영향.결론 성공지극륭료세립극구유AgB아단위기인,AgB1화AgB2기인재3충불동표체재체중적표체정황급대융합표첨단백적혈청기출반응성적비교분석표명,량개중조항원재pET32a재체중적표체우우pET28a화pGEX4T-1재체.
