CAJ | 학술논문

万方数据

南京大学学报(自然科学版) 남경대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NANJING UNIVERSITY
2004年 1期 58-65 ,共8页

陈均勇%陈新园%孙自勇%刘莉莉%朱镇华%汪晶%吴盛%王石泉%刘建宁

진균용%진신완%손자용%류리리%주진화%왕정%오성%왕석천%류건저

甲状旁腺激素,表达,纯化,纤维素结合结构域,Factor Xa 甲狀徬腺激素,錶達,純化,纖維素結閤結構域,Factor Xa
갑상방선격소,표체,순화,섬유소결합결구역,Factor Xa

将化学合成的rhPTH(1-34)基因用PCR扩增后,克隆至表达载体pET-35b(+),使rhPTH(1-34)融合于纤维素结合结构域(CBDdos)的羧基端,并得到高效表达.融合蛋白经纤维素树脂亲和层析纯化后,经Factor Xa裂解释放出rhPTH(1-34),再通过纤维素树脂亲和层析、C4反向高效液相色谱纯化得到rhPTH(1-34)纯品.每升培养液可获取3 mg高纯度的rhPTH(1-34).经质谱测定,所得样品的分子量为4 117.0 Da,与rhPTH(1-34)理论分子量一致.
장화학합성적rhPTH(1-34)기인용PCR확증후,극륭지표체재체pET-35b(+),사rhPTH(1-34)융합우섬유소결합결구역(CBDdos)적최기단,병득도고효표체.융합단백경섬유소수지친화층석순화후,경Factor Xa렬해석방출rhPTH(1-34),재통과섬유소수지친화층석、C4반향고효액상색보순화득도rhPTH(1-34)순품.매승배양액가획취3 mg고순도적rhPTH(1-34).경질보측정,소득양품적분자량위4 117.0 Da,여rhPTH(1-34)이론분자량일치.