CAJ | 학술논문

嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)能引起多种鱼类暴发性出血性败血症,为研制更加安全的嗜水气单胞菌口服活疫苗,构建了鱼源嗜水气单胞菌aopB-/aopD-/aroA-缺失株.首先构建含缺失369 bp的aopB/aopD基因(编码嗜水气单胞菌外膜蛋白B、D)与蔗糖敏感基冈(sacB)的重组自杀性质粒pREaopB/aopD,与嗜水气单胞菌Ah2056接合转移,应用二步法筛选aopB-/aopD-缺失株.PCR证实aopB/aopD基因的缺失突变.在此基础上,构建另一个含缺失1 290 bp的aroA基因(编码5-酸烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶)与庆大霉素抗性片段(aacCl片段)的重组自杀性质粒pSUParoA,与aopB-/aopD-缺失株接合转移,利用庆大霉素抗件筛选aopB-/aopD-/aroA-缺失株,用PCR证实aroA基因的缺失突变.进一步对aopB-/aopD-/aroA-缺失株进行生长特性、对鱼的毒力等生物学特性鉴定.结果表明,aopB-/aopD-/aroA-缺失株构建成功,且该缺失株为毒力丧失、营养缺陷株.
기수기단포균(Aeromonas hydrophila)능인기다충어류폭발성출혈성패혈증,위연제경가안전적기수기단포균구복활역묘,구건료어원기수기단포균aopB-/aopD-/aroA-결실주.수선구건함결실369 bp적aopB/aopD기인(편마기수기단포균외막단백B、D)여자당민감기강(sacB)적중조자살성질립pREaopB/aopD,여기수기단포균Ah2056접합전이,응용이보법사선aopB-/aopD-결실주.PCR증실aopB/aopD기인적결실돌변.재차기출상,구건령일개함결실1 290 bp적aroA기인(편마5-산희순식병동산망초산-3-린산합매)여경대매소항성편단(aacCl편단)적중조자살성질립pSUParoA,여aopB-/aopD-결실주접합전이,이용경대매소항건사선aopB-/aopD-/aroA-결실주,용PCR증실aroA기인적결실돌변.진일보대aopB-/aopD-/aroA-결실주진행생장특성、대어적독력등생물학특성감정.결과표명,aopB-/aopD-/aroA-결실주구건성공,차해결실주위독력상실、영양결함주.