CAJ | 학술논문

背景:研究胚胎干细胞分化为心肌细胞的条件和技术,进一步提高诱导分化率、细胞纯度,具有重要的理论和临床应用意义.目的:建立体外诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞模型,为体外研究心肌细胞发育提供合适的实验方法.方法:采用悬滴-悬浮-贴壁三步法(悬滴三步法)对未分化的胚胎干细胞进行体外诱导分化培养,并按诱导剂的不同分为6组,Ⅰ组:丹参+5-氮杂胞苷;Ⅱ组:丹参+维甲酸;Ⅲ组:5-氮杂胞苷;Ⅳ组:丹参;Ⅴ组:维甲酸;Ⅵ组:阴性对照.诱导剂加入后9 d,免疫细胞化学方法检测拟胚体α-actinin、myosin、α-actin的表达.结果与结论:诱导剂加入后第2天,倒置显微镜下见拟胚体自发性收缩,每个拟胚体可有1个或多个收缩中心.免疫细胞化学示心肌特异性结构蛋白α-actinin、myosin、α-actin均成阳性表达.Ⅰ组心肌细胞的分化率最高,与Ⅱ、Ⅵ组心肌细胞分化率比较差异有非常显著性意义(P < 0.01),与Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组比较差异有显著性意义(P < 0.05).结果显示悬滴三步法联合中药丹参与5-氮杂胞苷为诱导剂,可提高体外胚胎干细胞分化为心肌细胞的分化率.
배경:연구배태간세포분화위심기세포적조건화기술,진일보제고유도분화솔、세포순도,구유중요적이론화림상응용의의.목적:건입체외유도배태간세포분화위심기세포모형,위체외연구심기세포발육제공합괄적실험방법.방법:채용현적-현부-첩벽삼보법(현적삼보법)대미분화적배태간세포진행체외유도분화배양,병안유도제적불동분위6조,Ⅰ조:단삼+5-담잡포감;Ⅱ조:단삼+유갑산;Ⅲ조:5-담잡포감;Ⅳ조:단삼;Ⅴ조:유갑산;Ⅵ조:음성대조.유도제가입후9 d,면역세포화학방법검측의배체α-actinin、myosin、α-actin적표체.결과여결론:유도제가입후제2천,도치현미경하견의배체자발성수축,매개의배체가유1개혹다개수축중심.면역세포화학시심기특이성결구단백α-actinin、myosin、α-actin균성양성표체.Ⅰ조심기세포적분화솔최고,여Ⅱ、Ⅵ조심기세포분화솔비교차이유비상현저성의의(P < 0.01),여Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ조비교차이유현저성의의(P < 0.05).결과현시현적삼보법연합중약단삼여5-담잡포감위유도제,가제고체외배태간세포분화위심기세포적분화솔.