中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2011年
7期
304-308
,共5页
赵志荀%吴国华%颜新敏%李健%朱海霞%孙晓林%张强
趙誌荀%吳國華%顏新敏%李健%硃海霞%孫曉林%張彊
조지순%오국화%안신민%리건%주해하%손효림%장강
绵羊痘病毒%RPO30基因%序列分析%生物信息学
綿羊痘病毒%RPO30基因%序列分析%生物信息學
면양두병독%RPO30기인%서렬분석%생물신식학
选择羊痘病毒RNA聚合酶RPO30进行分析,为进行RNAi羊痘病毒研究,进行目的基因的初步筛选.PCR扩增RPO30基因,连入pMD18-T simple载体并转化DH5a大肠杆菌.经蓝白斑筛选挑选白斑制备质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定.结果成功克隆了RPO30基因,克隆的SSPV RPO30基因ORF 为585 bp,编码193个氨基酸,阅读框内有一个HindⅢ酶切位点,测序结果与GenBank数据库中不同痘病毒毒株之间同源性存在着明显区别.进一步经过生物学软件分析表明RPO30蛋白质氨基酸4-12、18-26、50-161、68-92,176-190位之间区域形成活性中心的可能性较大,选择这些区域进行作用可能会造成该基因产物酶的失活,从而高效抑制病毒的复制.
選擇羊痘病毒RNA聚閤酶RPO30進行分析,為進行RNAi羊痘病毒研究,進行目的基因的初步篩選.PCR擴增RPO30基因,連入pMD18-T simple載體併轉化DH5a大腸桿菌.經藍白斑篩選挑選白斑製備質粒,經雙酶切、PCR及測序鑒定.結果成功剋隆瞭RPO30基因,剋隆的SSPV RPO30基因ORF 為585 bp,編碼193箇氨基痠,閱讀框內有一箇HindⅢ酶切位點,測序結果與GenBank數據庫中不同痘病毒毒株之間同源性存在著明顯區彆.進一步經過生物學軟件分析錶明RPO30蛋白質氨基痠4-12、18-26、50-161、68-92,176-190位之間區域形成活性中心的可能性較大,選擇這些區域進行作用可能會造成該基因產物酶的失活,從而高效抑製病毒的複製.
선택양두병독RNA취합매RPO30진행분석,위진행RNAi양두병독연구,진행목적기인적초보사선.PCR확증RPO30기인,련입pMD18-T simple재체병전화DH5a대장간균.경람백반사선도선백반제비질립,경쌍매절、PCR급측서감정.결과성공극륭료RPO30기인,극륭적SSPV RPO30기인ORF 위585 bp,편마193개안기산,열독광내유일개HindⅢ매절위점,측서결과여GenBank수거고중불동두병독독주지간동원성존재착명현구별.진일보경과생물학연건분석표명RPO30단백질안기산4-12、18-26、50-161、68-92,176-190위지간구역형성활성중심적가능성교대,선택저사구역진행작용가능회조성해기인산물매적실활,종이고효억제병독적복제.
