现代实用医学
現代實用醫學
현대실용의학
MODERN PRACTICAL MEDICINE
2012年
3期
267-271
,共5页
徐炜烽%廉姜芳%黄晓燕%金丽华
徐煒烽%廉薑芳%黃曉燕%金麗華
서위봉%렴강방%황효연%금려화
肺纤维化%PI3K/Akt信号通路%p38MAPK信号通路%结缔组织生长因子
肺纖維化%PI3K/Akt信號通路%p38MAPK信號通路%結締組織生長因子
폐섬유화%PI3K/Akt신호통로%p38MAPK신호통로%결체조직생장인자
目的 探讨结缔组织生长因子(CTGF)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)转分化中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路的活动状态以及相关性的研究.方法 将体外培养的HFL-I分成4组:(1)CTGF处理组(20 ng/ml);(2) LY294002(10 μmol/L)预处理60min,再行CTGF刺激(20 ng/ml):(3)SB203580 (10 μmol/L)预处理60 min,再行CTGF刺激(20 ng/ml); (4)LY294002(10 μmol/L)和SB203580(10 μmol/L)联合作用60 min,再加入CTGF(20 ng/ml).选取不同时相点,Western blot测定平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、p-Akt和Akt的蛋白表达:RT-PCR检测PI3K和p38MAPKmRNA表达.结果 与对照组相比,CTGF诱导15 min后p-Akt水平升高,30 min时达至顶峰(P＜0.01).CTGF诱导24h后α-SMA表达显著升高(P＜0.01),可被LY294002阻断.LY294002和SB203580单独或联合预处理后,显著抑制CTGF诱导的p-Akt活化(P＜0.01).结论 CTGF诱导的成纤维细胞-肌成纤维细胞转分化中有PI3K/Akt通路的激活,PI3K和p38MAPK均可以调节Akt的活性,其特异性抑制剂均可阻断Akt的磷酸化.
目的 探討結締組織生長因子(CTGF)誘導的人胚肺成纖維細胞(HFL-I)轉分化中燐脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路的活動狀態以及相關性的研究.方法 將體外培養的HFL-I分成4組:(1)CTGF處理組(20 ng/ml);(2) LY294002(10 μmol/L)預處理60min,再行CTGF刺激(20 ng/ml):(3)SB203580 (10 μmol/L)預處理60 min,再行CTGF刺激(20 ng/ml); (4)LY294002(10 μmol/L)和SB203580(10 μmol/L)聯閤作用60 min,再加入CTGF(20 ng/ml).選取不同時相點,Western blot測定平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、p-Akt和Akt的蛋白錶達:RT-PCR檢測PI3K和p38MAPKmRNA錶達.結果 與對照組相比,CTGF誘導15 min後p-Akt水平升高,30 min時達至頂峰(P＜0.01).CTGF誘導24h後α-SMA錶達顯著升高(P＜0.01),可被LY294002阻斷.LY294002和SB203580單獨或聯閤預處理後,顯著抑製CTGF誘導的p-Akt活化(P＜0.01).結論 CTGF誘導的成纖維細胞-肌成纖維細胞轉分化中有PI3K/Akt通路的激活,PI3K和p38MAPK均可以調節Akt的活性,其特異性抑製劑均可阻斷Akt的燐痠化.
목적 탐토결체조직생장인자(CTGF)유도적인배폐성섬유세포(HFL-I)전분화중린지선기순3-격매/단백격매B(PI3K/Akt)화사렬원활화단백격매(p38MAPK)통로적활동상태이급상관성적연구.방법 장체외배양적HFL-I분성4조:(1)CTGF처리조(20 ng/ml);(2) LY294002(10 μmol/L)예처리60min,재행CTGF자격(20 ng/ml):(3)SB203580 (10 μmol/L)예처리60 min,재행CTGF자격(20 ng/ml); (4)LY294002(10 μmol/L)화SB203580(10 μmol/L)연합작용60 min,재가입CTGF(20 ng/ml).선취불동시상점,Western blot측정평활기기동단백(α-smooth muscle actin,α-SMA)、p-Akt화Akt적단백표체:RT-PCR검측PI3K화p38MAPKmRNA표체.결과 여대조조상비,CTGF유도15 min후p-Akt수평승고,30 min시체지정봉(P＜0.01).CTGF유도24h후α-SMA표체현저승고(P＜0.01),가피LY294002조단.LY294002화SB203580단독혹연합예처리후,현저억제CTGF유도적p-Akt활화(P＜0.01).결론 CTGF유도적성섬유세포-기성섬유세포전분화중유PI3K/Akt통로적격활,PI3K화p38MAPK균가이조절Akt적활성,기특이성억제제균가조단Akt적린산화.
