海南医学院学报
海南醫學院學報
해남의학원학보
2003年
2期
78-83
,共6页
李孟森%李平风%贺师鹏%杜国光%李刚
李孟森%李平風%賀師鵬%杜國光%李剛
리맹삼%리평풍%하사붕%두국광%리강
甲胎蛋白类%HeLa细胞%AFP受体%细胞增殖%信号传递
甲胎蛋白類%HeLa細胞%AFP受體%細胞增殖%信號傳遞
갑태단백류%HeLa세포%AFP수체%세포증식%신호전체
目的:观察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)调节HeLa细胞生长的细胞内信号转导机制.方法:用从人脐带血中提取的AFP作用于体外培养的HeLa细胞,通过MTT计数、3H-TdR参入法、流式细胞仪等研究细胞增殖;放射免疫结合法检测在AFP作用下,HeLa细胞第二信使物质环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)活性的改变;用共聚焦显微镜观测细胞内Ca2+浓度的变化;用Western blotting分析法分析P21ras表达.结果:①表明AFP(浓度大于10 mg/L)对HeLa细胞增殖有明显的促进作用.②在AFP(20 mg/L)作用下,PKA活性升高达122.6%,而Ca2+浓度升高达125.71%;P21ras蛋白表达在作用24 h时增高112.6%.③抗甲胎蛋白单克隆抗体能有效地阻断AFP对HeLa细胞信号转导的影响.结论:①AFP能促HeLa细胞生长;②AFP可能通过cAMP-PKA和Ca2+途径调节HeLa细胞生长.
目的:觀察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)調節HeLa細胞生長的細胞內信號轉導機製.方法:用從人臍帶血中提取的AFP作用于體外培養的HeLa細胞,通過MTT計數、3H-TdR參入法、流式細胞儀等研究細胞增殖;放射免疫結閤法檢測在AFP作用下,HeLa細胞第二信使物質環燐痠腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)活性的改變;用共聚焦顯微鏡觀測細胞內Ca2+濃度的變化;用Western blotting分析法分析P21ras錶達.結果:①錶明AFP(濃度大于10 mg/L)對HeLa細胞增殖有明顯的促進作用.②在AFP(20 mg/L)作用下,PKA活性升高達122.6%,而Ca2+濃度升高達125.71%;P21ras蛋白錶達在作用24 h時增高112.6%.③抗甲胎蛋白單剋隆抗體能有效地阻斷AFP對HeLa細胞信號轉導的影響.結論:①AFP能促HeLa細胞生長;②AFP可能通過cAMP-PKA和Ca2+途徑調節HeLa細胞生長.
목적:관찰갑태단백(alpha-fetoprotein,AFP)조절HeLa세포생장적세포내신호전도궤제.방법:용종인제대혈중제취적AFP작용우체외배양적HeLa세포,통과MTT계수、3H-TdR삼입법、류식세포의등연구세포증식;방사면역결합법검측재AFP작용하,HeLa세포제이신사물질배린산선감(cAMP)화단백격매A(PKA)활성적개변;용공취초현미경관측세포내Ca2+농도적변화;용Western blotting분석법분석P21ras표체.결과:①표명AFP(농도대우10 mg/L)대HeLa세포증식유명현적촉진작용.②재AFP(20 mg/L)작용하,PKA활성승고체122.6%,이Ca2+농도승고체125.71%;P21ras단백표체재작용24 h시증고112.6%.③항갑태단백단극륭항체능유효지조단AFP대HeLa세포신호전도적영향.결론:①AFP능촉HeLa세포생장;②AFP가능통과cAMP-PKA화Ca2+도경조절HeLa세포생장.
