检验医学与临床
檢驗醫學與臨床
검험의학여림상
JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE AND CLINICAL SCIENCES
2011年
6期
657-658,661
,共3页
崇慧峰%丁天凌%吴蓓倩%朱萍
崇慧峰%丁天凌%吳蓓倩%硃萍
숭혜봉%정천릉%오배천%주평
髓过氧化物酶%流式细胞术%胞浆内抗原
髓過氧化物酶%流式細胞術%胞漿內抗原
수과양화물매%류식세포술%포장내항원
目的 评价流式细胞仪检测胞浆内抗原髓过氧化物酶(MPO)的方法,探讨实验中各因素对检测结果的影响.方法 以HL-60细胞为模型,多参数流式细胞仪分析,比较3种不同破膜剂处理及不同处理时间,标本不同放置时间,不同荧光染料对实验结果的影响.结果 比较FACS、Fix & Perm、Fixation&Permeabilization 3种破膜剂,得出FACS破膜剂对细胞的前向散射角/侧向散射角(FSC/SSC)影响最小,相对荧光强度(RFI)明显高于其他两者,效果最佳.3种破膜剂均在破膜时间15 min时可达到最佳效果.标本放置在室温条件下,12 h内应对其进行处理,至24 h细胞已出现部分死亡,将影响实验结果的正确性.PE荧光的MPO在荧光强度上明显优于FITC荧光,因此推荐在条件允许的情况下,尽可能地选用PE荧光的MPO抗体.结论 流式细胞仪检测MPO的推荐方法:调整样本细胞数,应用FACS破膜剂15 min,标本必须当天完成检测,尽量采用PE标记的MPO抗体.
目的 評價流式細胞儀檢測胞漿內抗原髓過氧化物酶(MPO)的方法,探討實驗中各因素對檢測結果的影響.方法 以HL-60細胞為模型,多參數流式細胞儀分析,比較3種不同破膜劑處理及不同處理時間,標本不同放置時間,不同熒光染料對實驗結果的影響.結果 比較FACS、Fix & Perm、Fixation&Permeabilization 3種破膜劑,得齣FACS破膜劑對細胞的前嚮散射角/側嚮散射角(FSC/SSC)影響最小,相對熒光彊度(RFI)明顯高于其他兩者,效果最佳.3種破膜劑均在破膜時間15 min時可達到最佳效果.標本放置在室溫條件下,12 h內應對其進行處理,至24 h細胞已齣現部分死亡,將影響實驗結果的正確性.PE熒光的MPO在熒光彊度上明顯優于FITC熒光,因此推薦在條件允許的情況下,儘可能地選用PE熒光的MPO抗體.結論 流式細胞儀檢測MPO的推薦方法:調整樣本細胞數,應用FACS破膜劑15 min,標本必鬚噹天完成檢測,儘量採用PE標記的MPO抗體.
목적 평개류식세포의검측포장내항원수과양화물매(MPO)적방법,탐토실험중각인소대검측결과적영향.방법 이HL-60세포위모형,다삼수류식세포의분석,비교3충불동파막제처리급불동처리시간,표본불동방치시간,불동형광염료대실험결과적영향.결과 비교FACS、Fix & Perm、Fixation&Permeabilization 3충파막제,득출FACS파막제대세포적전향산사각/측향산사각(FSC/SSC)영향최소,상대형광강도(RFI)명현고우기타량자,효과최가.3충파막제균재파막시간15 min시가체도최가효과.표본방치재실온조건하,12 h내응대기진행처리,지24 h세포이출현부분사망,장영향실험결과적정학성.PE형광적MPO재형광강도상명현우우FITC형광,인차추천재조건윤허적정황하,진가능지선용PE형광적MPO항체.결론 류식세포의검측MPO적추천방법:조정양본세포수,응용FACS파막제15 min,표본필수당천완성검측,진량채용PE표기적MPO항체.
