CAJ | 학술논문

目的:阐明NK细胞系持续活化的信号通路ERK1/2在调节NK细胞增殖和杀伤活性中可能发挥的作用.方法:制备NK-92和YT细胞的全细胞提取物,进行Western blot,检测在细胞系中持续活化的信号传导途径,信号通路特异性阻断剂PD098059阻断ERK1/2活化,MTT方法评价ERK1/2在调节NK细胞杀伤和增殖活性中发挥的作用,RT-PCR检测阻断试剂作用前后杀伤相关分子表达水平的变化.结果:2个代表性的NK细胞系(YT,IL-2非依赖;NK-92,IL-2依赖)中存在ERK1/2(p44/42MAPK)、NF-κB和STAT3信号通路的持续磷酸化,去除IL-2和血清较长时间后仍保持活化状态,而其它信号途径(STAT1、STAT6、PI-3K、p38MAPK)则未见活化.特异性阻断剂PD098059 200 μmol/L阻断ERK1/2活化后,NK细胞杀伤K562靶细胞的能力显著降低,但细胞的增殖活性不受影响.RT-PCR证实,PD098059阻断ERK1/2抑制NK细胞毒活性的同时,杀伤相关分子IFNγ、FasL、perforin的表达水平也不同程度地下调.结论:NK细胞系中持续性活化的ERK1/2主要传递与NK细胞细胞毒性相关的信号,并不参与调节细胞的增殖,该途径通过控制杀伤相关分子IFNγ、FasL、perforin的基因表达从而主导NK对靶细胞的杀伤.
목적:천명NK세포계지속활화적신호통로ERK1/2재조절NK세포증식화살상활성중가능발휘적작용.방법:제비NK-92화YT세포적전세포제취물,진행Western blot,검측재세포계중지속활화적신호전도도경,신호통로특이성조단제PD098059조단ERK1/2활화,MTT방법평개ERK1/2재조절NK세포살상화증식활성중발휘적작용,RT-PCR검측조단시제작용전후살상상관분자표체수평적변화.결과:2개대표성적NK세포계(YT,IL-2비의뢰;NK-92,IL-2의뢰)중존재ERK1/2(p44/42MAPK)、NF-κB화STAT3신호통로적지속린산화,거제IL-2화혈청교장시간후잉보지활화상태,이기타신호도경(STAT1、STAT6、PI-3K、p38MAPK)칙미견활화.특이성조단제PD098059 200 μmol/L조단ERK1/2활화후,NK세포살상K562파세포적능력현저강저,단세포적증식활성불수영향.RT-PCR증실,PD098059조단ERK1/2억제NK세포독활성적동시,살상상관분자IFNγ、FasL、perforin적표체수평야불동정도지하조.결론:NK세포계중지속성활화적ERK1/2주요전체여NK세포세포독성상관적신호,병불삼여조절세포적증식,해도경통과공제살상상관분자IFNγ、FasL、perforin적기인표체종이주도NK대파세포적살상.