中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
7期
1169-1173
,共5页
张平%刘斌%蔡道章%钟志宏%潘永谦%张振山
張平%劉斌%蔡道章%鐘誌宏%潘永謙%張振山
장평%류빈%채도장%종지굉%반영겸%장진산
白细胞介素1受体拮抗蛋白%基因转染%荧光%质粒%软骨细胞%表达
白細胞介素1受體拮抗蛋白%基因轉染%熒光%質粒%軟骨細胞%錶達
백세포개소1수체길항단백%기인전염%형광%질립%연골세포%표체
背景:白细胞介素1受体拮抗蛋白能延缓骨性关节炎进程,通过转基因方法可以使白细胞介素1受体拮抗蛋白表达的增加.目的:观察重组人重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白荧光质粒的构建及经脂质体转染软骨细胞的表达情况.方法:双酶切法切取重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白的c-DNA片段,通过T4DNA连接酶连接到pEGFP-C1载体上.体外分离培养兔关节软骨细胞,然后用构建的重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白质粒经脂质体转染软骨细胞,通过荧光显微镜观察转基因的表达和荧光定量PCR检测其表达.结果与结论:获得重组人pEGFP-C1-IL-1Ra真核表达载体质粒,酶切及测序结果证明表达质粒的DNA序列完全正确.荧光显微镜观察有绿色荧光蛋白表达,荧光定量PCR鉴定证实转染的软骨细胞基因得到表达.
揹景:白細胞介素1受體拮抗蛋白能延緩骨性關節炎進程,通過轉基因方法可以使白細胞介素1受體拮抗蛋白錶達的增加.目的:觀察重組人重組人白細胞介素1受體拮抗蛋白熒光質粒的構建及經脂質體轉染軟骨細胞的錶達情況.方法:雙酶切法切取重組人白細胞介素1受體拮抗蛋白的c-DNA片段,通過T4DNA連接酶連接到pEGFP-C1載體上.體外分離培養兔關節軟骨細胞,然後用構建的重組人白細胞介素1受體拮抗蛋白質粒經脂質體轉染軟骨細胞,通過熒光顯微鏡觀察轉基因的錶達和熒光定量PCR檢測其錶達.結果與結論:穫得重組人pEGFP-C1-IL-1Ra真覈錶達載體質粒,酶切及測序結果證明錶達質粒的DNA序列完全正確.熒光顯微鏡觀察有綠色熒光蛋白錶達,熒光定量PCR鑒定證實轉染的軟骨細胞基因得到錶達.
배경:백세포개소1수체길항단백능연완골성관절염진정,통과전기인방법가이사백세포개소1수체길항단백표체적증가.목적:관찰중조인중조인백세포개소1수체길항단백형광질립적구건급경지질체전염연골세포적표체정황.방법:쌍매절법절취중조인백세포개소1수체길항단백적c-DNA편단,통과T4DNA련접매련접도pEGFP-C1재체상.체외분리배양토관절연골세포,연후용구건적중조인백세포개소1수체길항단백질립경지질체전염연골세포,통과형광현미경관찰전기인적표체화형광정량PCR검측기표체.결과여결론:획득중조인pEGFP-C1-IL-1Ra진핵표체재체질립,매절급측서결과증명표체질립적DNA서렬완전정학.형광현미경관찰유록색형광단백표체,형광정량PCR감정증실전염적연골세포기인득도표체.
