癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2004年
4期
217-219,234
,共4页
欧阳松应%徐寿水%沈文律%周传香%李春艳%欧阳红生
歐暘鬆應%徐壽水%瀋文律%週傳香%李春豔%歐暘紅生
구양송응%서수수%침문률%주전향%리춘염%구양홍생
基因克隆%抑癌基因PTEN%基因,抑制,肿瘤%表达载体
基因剋隆%抑癌基因PTEN%基因,抑製,腫瘤%錶達載體
기인극륭%억암기인PTEN%기인,억제,종류%표체재체
背景与目的:克隆人野生型和突变型PTEN的cDNA并构建其表达载体,探讨该表达质粒在人星形胶质瘤细胞U251中的表达情况.材料与方法:分别从新鲜胎盘组织和结肠癌组织中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增人野生型和突变型PTEN基因全长cDNA,分别克隆入pMD 18-T载体上,经PCR、酶切鉴定均为阳性的克隆,进行核苷酸序列分析.再分别将两段基因定向克隆入pcDNA3.1(+)载体中构建表达载体,转染入U251细胞.结果:成功克隆了人野生型及突变型PTEN cDNA并成功构建其表达载体,发现突变型PTEN蛋白对细胞生长无明显抑制作用,而野生型PTEN蛋白对细胞生长有明显抑制作用.结论:PTEN可能能抑制肿瘤细胞生长,为后进一步开展PTEN对肿瘤相关功能的研究奠定基础.
揹景與目的:剋隆人野生型和突變型PTEN的cDNA併構建其錶達載體,探討該錶達質粒在人星形膠質瘤細胞U251中的錶達情況.材料與方法:分彆從新鮮胎盤組織和結腸癌組織中提取總RNA,採用RT-PCR的方法擴增人野生型和突變型PTEN基因全長cDNA,分彆剋隆入pMD 18-T載體上,經PCR、酶切鑒定均為暘性的剋隆,進行覈苷痠序列分析.再分彆將兩段基因定嚮剋隆入pcDNA3.1(+)載體中構建錶達載體,轉染入U251細胞.結果:成功剋隆瞭人野生型及突變型PTEN cDNA併成功構建其錶達載體,髮現突變型PTEN蛋白對細胞生長無明顯抑製作用,而野生型PTEN蛋白對細胞生長有明顯抑製作用.結論:PTEN可能能抑製腫瘤細胞生長,為後進一步開展PTEN對腫瘤相關功能的研究奠定基礎.
배경여목적:극륭인야생형화돌변형PTEN적cDNA병구건기표체재체,탐토해표체질립재인성형효질류세포U251중적표체정황.재료여방법:분별종신선태반조직화결장암조직중제취총RNA,채용RT-PCR적방법확증인야생형화돌변형PTEN기인전장cDNA,분별극륭입pMD 18-T재체상,경PCR、매절감정균위양성적극륭,진행핵감산서렬분석.재분별장량단기인정향극륭입pcDNA3.1(+)재체중구건표체재체,전염입U251세포.결과:성공극륭료인야생형급돌변형PTEN cDNA병성공구건기표체재체,발현돌변형PTEN단백대세포생장무명현억제작용,이야생형PTEN단백대세포생장유명현억제작용.결론:PTEN가능능억제종류세포생장,위후진일보개전PTEN대종류상관공능적연구전정기출.
