四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2005年
3期
588-591
,共4页
孙元田%肖冰%徐洁杰%潘克俭%陈平%胡火珍
孫元田%肖冰%徐潔傑%潘剋儉%陳平%鬍火珍
손원전%초빙%서길걸%반극검%진평%호화진
人神经营养素-4%原核表达%融合蛋白%分离纯化
人神經營養素-4%原覈錶達%融閤蛋白%分離純化
인신경영양소-4%원핵표체%융합단백%분리순화
以人外周血淋巴细胞基因组DNA为模板,用PCR方法扩增出神经营养素-4基因(NT-4)成熟蛋白的DNA序列,并将其克隆到表达载体pET32a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经异丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后高效特异表达了分子量约为35kD的蛋白,诱导表达的蛋白主要存在于包涵体中,经Ni2+ -NTA树脂亲和层析纯化,得到了纯度达94%的NT-4成熟蛋白的融合蛋白.为进一步研究NT-4的生物学活性及在临床治疗中的作用打下了基础.
以人外週血淋巴細胞基因組DNA為模闆,用PCR方法擴增齣神經營養素-4基因(NT-4)成熟蛋白的DNA序列,併將其剋隆到錶達載體pET32a中,在大腸桿菌BL21(DE3)中經異丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)誘導後高效特異錶達瞭分子量約為35kD的蛋白,誘導錶達的蛋白主要存在于包涵體中,經Ni2+ -NTA樹脂親和層析純化,得到瞭純度達94%的NT-4成熟蛋白的融閤蛋白.為進一步研究NT-4的生物學活性及在臨床治療中的作用打下瞭基礎.
이인외주혈림파세포기인조DNA위모판,용PCR방법확증출신경영양소-4기인(NT-4)성숙단백적DNA서렬,병장기극륭도표체재체pET32a중,재대장간균BL21(DE3)중경이병기-β-D-반유당감(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)유도후고효특이표체료분자량약위35kD적단백,유도표체적단백주요존재우포함체중,경Ni2+ -NTA수지친화층석순화,득도료순도체94%적NT-4성숙단백적융합단백.위진일보연구NT-4적생물학활성급재림상치료중적작용타하료기출.
