CAJ | 학술논문

目的探讨制备兔耳廓天然软骨细胞外基质材料的新方法,制备适用于组织工程应用的天然生物支架材料.方法①采用多步骤去污剂-酶处理技术抽提兔耳廓软骨细胞制备天然软骨细胞外基质(Nature Extracellular Matrix,NECM),对NECM行HE染色、澳新蓝染色、维多利亚蓝染色、VanGieson染色并进行组织学及扫描电镜观察;②以灰家兔NECM为支架材料和新西兰大白兔耳廓软骨细胞为种子细胞进行体外培养,倒置显微镜下观察其亲水性和对细胞的吸附力,并通过四氮唑盐比色法(MTT Assay)观察NECM对软骨细胞的增殖作用.结果通过HE染色、蛋白多糖、胶原及弹力纤维特染、扫描电镜观察分析证实经过多步骤去污剂-酶法抽提软骨细胞制备的天然生物支架材料里,不含细胞及细胞器成分,仅含有不溶解的胶原、弹性蛋白和蛋白多糖,亦即NECM;体外培养实验发现,兔耳廓软骨细胞易进入脱细胞异体软骨基质结构裸露的空穴,且生长旺盛,组织学检查证实兔耳廓软骨NECM上裸露的骨陷窝已部分被软骨细胞占据.MTT Assay检测证实NECM对软骨细胞增殖有促进作用.结论本实验制备的NECM脱细胞彻底、细胞外基质成分保留较完整,并具有促进细胞粘附、增殖和分化生长的作用,是一种较为理想的天然生物支架材料.
목적탐토제비토이곽천연연골세포외기질재료적신방법,제비괄용우조직공정응용적천연생물지가재료.방법①채용다보취거오제-매처리기술추제토이곽연골세포제비천연연골세포외기질(Nature Extracellular Matrix,NECM),대NECM행HE염색、오신람염색、유다리아람염색、VanGieson염색병진행조직학급소묘전경관찰;②이회가토NECM위지가재료화신서란대백토이곽연골세포위충자세포진행체외배양,도치현미경하관찰기친수성화대세포적흡부력,병통과사담서염비색법(MTT Assay)관찰NECM대연골세포적증식작용.결과통과HE염색、단백다당、효원급탄력섬유특염、소묘전경관찰분석증실경과다보취거오제-매법추제연골세포제비적천연생물지가재료리,불함세포급세포기성분,부함유불용해적효원、탄성단백화단백다당,역즉NECM;체외배양실험발현,토이곽연골세포역진입탈세포이체연골기질결구라로적공혈,차생장왕성,조직학검사증실토이곽연골NECM상라로적골함와이부분피연골세포점거.MTT Assay검측증실NECM대연골세포증식유촉진작용.결론본실험제비적NECM탈세포철저、세포외기질성분보류교완정,병구유촉진세포점부、증식화분화생장적작용,시일충교위이상적천연생물지가재료.