中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2006年
6期
55-58
,共4页
家兔%IFRG%RT-PCR%融合蛋白%Western 杂交
傢兔%IFRG%RT-PCR%融閤蛋白%Western 雜交
가토%IFRG%RT-PCR%융합단백%Western 잡교
近来的研究表明干扰素在哺乳动物早期胚胎发育中有重要的作用.首次克隆了兔早期胚胎发育相关新基因IFRG(干扰素应答基因)的全长cDNA序列(AJ584672),根据该cDNA序列以兔卵巢cDNA为模板,经PCR扩增后克隆了兔IFRG cDNA的完整开放阅读框(396bp).将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上,在大肠杆菌BL21中进行了GST-IFRG融合蛋白的表达.经IPTG诱导培养后,SDS-PAGE电泳检测结果显示在41kDa处有特异性表达蛋白,回收融合蛋白作为抗原免疫小鼠,制备多克隆抗体,通过Western杂交表明该融合蛋白具有生物免疫活性.
近來的研究錶明榦擾素在哺乳動物早期胚胎髮育中有重要的作用.首次剋隆瞭兔早期胚胎髮育相關新基因IFRG(榦擾素應答基因)的全長cDNA序列(AJ584672),根據該cDNA序列以兔卵巢cDNA為模闆,經PCR擴增後剋隆瞭兔IFRG cDNA的完整開放閱讀框(396bp).將其剋隆到原覈錶達載體pGEX-4T-2上,在大腸桿菌BL21中進行瞭GST-IFRG融閤蛋白的錶達.經IPTG誘導培養後,SDS-PAGE電泳檢測結果顯示在41kDa處有特異性錶達蛋白,迴收融閤蛋白作為抗原免疫小鼠,製備多剋隆抗體,通過Western雜交錶明該融閤蛋白具有生物免疫活性.
근래적연구표명간우소재포유동물조기배태발육중유중요적작용.수차극륭료토조기배태발육상관신기인IFRG(간우소응답기인)적전장cDNA서렬(AJ584672),근거해cDNA서렬이토란소cDNA위모판,경PCR확증후극륭료토IFRG cDNA적완정개방열독광(396bp).장기극륭도원핵표체재체pGEX-4T-2상,재대장간균BL21중진행료GST-IFRG융합단백적표체.경IPTG유도배양후,SDS-PAGE전영검측결과현시재41kDa처유특이성표체단백,회수융합단백작위항원면역소서,제비다극륭항체,통과Western잡교표명해융합단백구유생물면역활성.
