中国临床康复
中國臨床康複
중국림상강복
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATION
2006年
21期
30-33,插2
,共5页
程昊钰%何明生%王廷华%张洪钿%王方方%刘鲲%黄桂琴%胡艳丽
程昊鈺%何明生%王廷華%張洪鈿%王方方%劉鯤%黃桂琴%鬍豔麗
정호옥%하명생%왕정화%장홍전%왕방방%류곤%황계금%호염려
抗原,CD34%脊髓损伤%神经行为学表现%功能恢复
抗原,CD34%脊髓損傷%神經行為學錶現%功能恢複
항원,CD34%척수손상%신경행위학표현%공능회복
目的:观察脊髓全横断SD大鼠模型骨髓CD34+细胞移植术后,脊髓功能恢复情况.方法:实验于2004-11/2005-07在昆明医学院神经科学研究所完成.①采用Percoll细胞分离液离心+贴壁分离法对绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓细胞进行粗筛后,收集骨髓悬浮细胞进行体外培养,密切观察细胞生长情况.②收集培养至第3周的悬浮细胞,采用免疫细胞化学法进行CD34单克隆抗体鉴定.③选健康雌性SD大鼠30只,采用随机数字法分为移植组和对照组,每组15只(1 d,1,2,4和8周各3只).将经CD34单克隆抗体鉴定后的CD34+细胞移植入脊髓全横断大鼠模型脊髓横断处尾侧.④术后密切观察大鼠后肢运动功能恢复情况,分别在术后1 d,2,4和8周行BBB评分检测大鼠后肢运动功能的恢复.⑤同时行冰冻切片于荧光显微镜下观察绿色荧光细胞的分布情况,并用免疫组织化学法检测CD34+细胞的存活.结果:对照组大鼠第22天死亡1只,进入结果分析29只.①免疫荧光镜下见,培养至两三周的骨髓悬浮细胞中,圆形绿色荧光细胞可达90%以上.②免疫细胞化学染色结果显示,培养至两三周后的骨髓悬浮细胞多数呈CD34阳性,阳性率达(74.6±1.7)%.③两组大鼠BBB评分结果显示,移植组大鼠后肢自主运动功能的恢复明显优于对照组.④移植后2,4和8周时移植组脊髓横断处头尾两侧均可见绿色荧光细胞,且多分布于灰质中,散在或聚集成片;免疫组织化学法可见移植组脊髓横断处头尾两侧切片中均有CD34+细胞散在.结论:移植骨髓CD34+细胞可在脊髓全横断大鼠脊髓中存活并迁移,其大鼠后肢自主运动功能得到部分恢复.
目的:觀察脊髓全橫斷SD大鼠模型骨髓CD34+細胞移植術後,脊髓功能恢複情況.方法:實驗于2004-11/2005-07在昆明醫學院神經科學研究所完成.①採用Percoll細胞分離液離心+貼壁分離法對綠色熒光蛋白轉基因小鼠骨髓細胞進行粗篩後,收集骨髓懸浮細胞進行體外培養,密切觀察細胞生長情況.②收集培養至第3週的懸浮細胞,採用免疫細胞化學法進行CD34單剋隆抗體鑒定.③選健康雌性SD大鼠30隻,採用隨機數字法分為移植組和對照組,每組15隻(1 d,1,2,4和8週各3隻).將經CD34單剋隆抗體鑒定後的CD34+細胞移植入脊髓全橫斷大鼠模型脊髓橫斷處尾側.④術後密切觀察大鼠後肢運動功能恢複情況,分彆在術後1 d,2,4和8週行BBB評分檢測大鼠後肢運動功能的恢複.⑤同時行冰凍切片于熒光顯微鏡下觀察綠色熒光細胞的分佈情況,併用免疫組織化學法檢測CD34+細胞的存活.結果:對照組大鼠第22天死亡1隻,進入結果分析29隻.①免疫熒光鏡下見,培養至兩三週的骨髓懸浮細胞中,圓形綠色熒光細胞可達90%以上.②免疫細胞化學染色結果顯示,培養至兩三週後的骨髓懸浮細胞多數呈CD34暘性,暘性率達(74.6±1.7)%.③兩組大鼠BBB評分結果顯示,移植組大鼠後肢自主運動功能的恢複明顯優于對照組.④移植後2,4和8週時移植組脊髓橫斷處頭尾兩側均可見綠色熒光細胞,且多分佈于灰質中,散在或聚集成片;免疫組織化學法可見移植組脊髓橫斷處頭尾兩側切片中均有CD34+細胞散在.結論:移植骨髓CD34+細胞可在脊髓全橫斷大鼠脊髓中存活併遷移,其大鼠後肢自主運動功能得到部分恢複.
목적:관찰척수전횡단SD대서모형골수CD34+세포이식술후,척수공능회복정황.방법:실험우2004-11/2005-07재곤명의학원신경과학연구소완성.①채용Percoll세포분리액리심+첩벽분리법대록색형광단백전기인소서골수세포진행조사후,수집골수현부세포진행체외배양,밀절관찰세포생장정황.②수집배양지제3주적현부세포,채용면역세포화학법진행CD34단극륭항체감정.③선건강자성SD대서30지,채용수궤수자법분위이식조화대조조,매조15지(1 d,1,2,4화8주각3지).장경CD34단극륭항체감정후적CD34+세포이식입척수전횡단대서모형척수횡단처미측.④술후밀절관찰대서후지운동공능회복정황,분별재술후1 d,2,4화8주행BBB평분검측대서후지운동공능적회복.⑤동시행빙동절편우형광현미경하관찰록색형광세포적분포정황,병용면역조직화학법검측CD34+세포적존활.결과:대조조대서제22천사망1지,진입결과분석29지.①면역형광경하견,배양지량삼주적골수현부세포중,원형록색형광세포가체90%이상.②면역세포화학염색결과현시,배양지량삼주후적골수현부세포다수정CD34양성,양성솔체(74.6±1.7)%.③량조대서BBB평분결과현시,이식조대서후지자주운동공능적회복명현우우대조조.④이식후2,4화8주시이식조척수횡단처두미량측균가견록색형광세포,차다분포우회질중,산재혹취집성편;면역조직화학법가견이식조척수횡단처두미량측절편중균유CD34+세포산재.결론:이식골수CD34+세포가재척수전횡단대서척수중존활병천이,기대서후지자주운동공능득도부분회복.
