抗乙型肝炎病毒表面抗原的IgG全抗体表达载体的构建
항을형간염병독표면항원적IgG전항체표체재체적구건
Construction of Expression Vector for Complete IgG Antibody against HBsAg
  • 万方数据
    中国生物制品学杂志 중국생물제품학잡지
    CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
    2007年 3期 170-173 ,共4页

    黄仕和%彭祥兵%张爱华%闭兰%余键%周志军%余模松%梁米芳

    황사화%팽상병%장애화%폐란%여건%주지군%여모송%량미방

    乙型肝炎病毒表面抗原%基因工程抗体%杆状病毒 乙型肝炎病毒錶麵抗原%基因工程抗體%桿狀病毒
    을형간염병독표면항원%기인공정항체%간상병독
    目的 构建抗乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的IgG全抗体杆状病毒表达载体.方法 用PCR方法扩增抗HBsAg 抗体Fab片段的轻链(L)及重链Fd段(VH+CH1)基因片段,将杆状病毒载体pAC-k-Fc与L基因连接,重组为过渡表达载体pAC-k-L-Fc,再与Fd基因连接,构建重组表达载体pAC-HBs-Fc,并进行酶切鉴定及DNA测序分析.确定正确后,转染昆虫细胞sf9,用免疫荧光检测IgG的表达.结果 PCR扩增的片段约650 bp,与预期值一致.载体pAC-k-L-Fc和pAC-HBs-Fc的酶切片段和DNA序列与预期结果一致.转染sf9细胞呈阳性荧光反应,未转染细胞呈阴性荧光反应.结论 已成功构建表达载体pAC-HBs-Fc,为表达抗人HBsAg的IgG全抗体奠定了基础.
    목적 구건항을형간염병독표면항원(HBsAg)적IgG전항체간상병독표체재체.방법 용PCR방법확증항HBsAg 항체Fab편단적경련(L)급중련Fd단(VH+CH1)기인편단,장간상병독재체pAC-k-Fc여L기인련접,중조위과도표체재체pAC-k-L-Fc,재여Fd기인련접,구건중조표체재체pAC-HBs-Fc,병진행매절감정급DNA측서분석.학정정학후,전염곤충세포sf9,용면역형광검측IgG적표체.결과 PCR확증적편단약650 bp,여예기치일치.재체pAC-k-L-Fc화pAC-HBs-Fc적매절편단화DNA서렬여예기결과일치.전염sf9세포정양성형광반응,미전염세포정음성형광반응.결론 이성공구건표체재체pAC-HBs-Fc,위표체항인HBsAg적IgG전항체전정료기출.
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