中国普外基础与临床杂志
中國普外基礎與臨床雜誌
중국보외기출여림상잡지
CHINESE JOURNAL OF BASES AND CLINICS IN GENERAL SURGERY
2008年
6期
402-407
,共6页
霍鑫%冯金炜%刘方峰%孔宏亮%严永吉%张强
霍鑫%馮金煒%劉方峰%孔宏亮%嚴永吉%張彊
곽흠%풍금위%류방봉%공굉량%엄영길%장강
骨髓间充质干细胞%增强型绿色荧光蛋白%Akt基因%后肢缺血%血管生成
骨髓間充質榦細胞%增彊型綠色熒光蛋白%Akt基因%後肢缺血%血管生成
골수간충질간세포%증강형록색형광단백%Akt기인%후지결혈%혈관생성
目的 探讨经肌肉注射转染pEGFP-C1/Akt的鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对后肢缺血大鼠血管生成的影响.方法 Wistar大鼠30只,制成双后肢缺血模型,双盲法随机分为基因治疗组(肌注经pEGFP-C1/Akt转染的MSCs)、非基因治疗组(肌注MSCs)及对照组(肌注PBS液).造模前、造膜后即刻及MSCs移植后1～7 d内,每天用红外线皮温仪测定大鼠后肢皮温变化.28 d时经动脉造影观察后肢血管生成情况; 免疫组化染色检测后肢毛细血管密度; 逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测后肢肌肉组织中Akt及血管内皮细胞生长因子(VEGF)的 mRNA和蛋白的表达.结果 移植3 d后基因治疗组大鼠后肢皮温升高明显.28 d时经动脉造影观察基因治疗组后肢侧支血管生成明显; 荧光显微镜观察有绿色荧光细胞在基因治疗组的内收肌和半膜肌分布.毛细血管密度: 基因治疗组为(7.1±0.3)个/高倍镜,非基因治疗组为(4.2±0.4)个/高倍镜,对照组为(1.3±0.2)个/高倍镜,各组间差异均有统计学意义(P＜0.01).Akt及VEGF的 mRNA和蛋白的表达分析: 基因治疗组Akt mRNA(2.44±0.14)和蛋白(1.12±0.13)及VEGF mRNA(1.11±0.11)和蛋白(0.97±0.13)表达水平均明显高于非基因治疗组Akt mRNA(1.58±0.13)和蛋白(0.78±0.12)及VEGF mRNA(0.78±0.14)和蛋白(0.67±0.11)以及对照组Akt mRNA(0.64±0.11)和蛋白(0.36±0.12)及VEGF mRNA(0.56±0.11)和蛋白(0.33±0.13)的表达水平(P＜0.01),后2组间比较差异亦均有统计学意义(P＜0.01).结论 pEGFP-C1/Akt体外转染骨髓MSCs促进后肢缺血大鼠血管生成的效果优于单纯MSCs治疗,为基因转染MSCs治疗缺血性疾病提供可能.
目的 探討經肌肉註射轉染pEGFP-C1/Akt的鼠骨髓間充質榦細胞(MSCs)對後肢缺血大鼠血管生成的影響.方法 Wistar大鼠30隻,製成雙後肢缺血模型,雙盲法隨機分為基因治療組(肌註經pEGFP-C1/Akt轉染的MSCs)、非基因治療組(肌註MSCs)及對照組(肌註PBS液).造模前、造膜後即刻及MSCs移植後1～7 d內,每天用紅外線皮溫儀測定大鼠後肢皮溫變化.28 d時經動脈造影觀察後肢血管生成情況; 免疫組化染色檢測後肢毛細血管密度; 逆轉錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)和Western blot法檢測後肢肌肉組織中Akt及血管內皮細胞生長因子(VEGF)的 mRNA和蛋白的錶達.結果 移植3 d後基因治療組大鼠後肢皮溫升高明顯.28 d時經動脈造影觀察基因治療組後肢側支血管生成明顯; 熒光顯微鏡觀察有綠色熒光細胞在基因治療組的內收肌和半膜肌分佈.毛細血管密度: 基因治療組為(7.1±0.3)箇/高倍鏡,非基因治療組為(4.2±0.4)箇/高倍鏡,對照組為(1.3±0.2)箇/高倍鏡,各組間差異均有統計學意義(P＜0.01).Akt及VEGF的 mRNA和蛋白的錶達分析: 基因治療組Akt mRNA(2.44±0.14)和蛋白(1.12±0.13)及VEGF mRNA(1.11±0.11)和蛋白(0.97±0.13)錶達水平均明顯高于非基因治療組Akt mRNA(1.58±0.13)和蛋白(0.78±0.12)及VEGF mRNA(0.78±0.14)和蛋白(0.67±0.11)以及對照組Akt mRNA(0.64±0.11)和蛋白(0.36±0.12)及VEGF mRNA(0.56±0.11)和蛋白(0.33±0.13)的錶達水平(P＜0.01),後2組間比較差異亦均有統計學意義(P＜0.01).結論 pEGFP-C1/Akt體外轉染骨髓MSCs促進後肢缺血大鼠血管生成的效果優于單純MSCs治療,為基因轉染MSCs治療缺血性疾病提供可能.
목적 탐토경기육주사전염pEGFP-C1/Akt적서골수간충질간세포(MSCs)대후지결혈대서혈관생성적영향.방법 Wistar대서30지,제성쌍후지결혈모형,쌍맹법수궤분위기인치료조(기주경pEGFP-C1/Akt전염적MSCs)、비기인치료조(기주MSCs)급대조조(기주PBS액).조모전、조막후즉각급MSCs이식후1～7 d내,매천용홍외선피온의측정대서후지피온변화.28 d시경동맥조영관찰후지혈관생성정황; 면역조화염색검측후지모세혈관밀도; 역전록-다취매련반응(RT-PCR)화Western blot법검측후지기육조직중Akt급혈관내피세포생장인자(VEGF)적 mRNA화단백적표체.결과 이식3 d후기인치료조대서후지피온승고명현.28 d시경동맥조영관찰기인치료조후지측지혈관생성명현; 형광현미경관찰유록색형광세포재기인치료조적내수기화반막기분포.모세혈관밀도: 기인치료조위(7.1±0.3)개/고배경,비기인치료조위(4.2±0.4)개/고배경,대조조위(1.3±0.2)개/고배경,각조간차이균유통계학의의(P＜0.01).Akt급VEGF적 mRNA화단백적표체분석: 기인치료조Akt mRNA(2.44±0.14)화단백(1.12±0.13)급VEGF mRNA(1.11±0.11)화단백(0.97±0.13)표체수평균명현고우비기인치료조Akt mRNA(1.58±0.13)화단백(0.78±0.12)급VEGF mRNA(0.78±0.14)화단백(0.67±0.11)이급대조조Akt mRNA(0.64±0.11)화단백(0.36±0.12)급VEGF mRNA(0.56±0.11)화단백(0.33±0.13)적표체수평(P＜0.01),후2조간비교차이역균유통계학의의(P＜0.01).결론 pEGFP-C1/Akt체외전염골수MSCs촉진후지결혈대서혈관생성적효과우우단순MSCs치료,위기인전염MSCs치료결혈성질병제공가능.
