CAJ | 학술논문

通过定向进化的方法, 提高了一个新的源于枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) 的脂肪酶 (BSL2) 的活力. 经过两轮易错 PCR 以及高通量筛选, 最终获得了比活力为野生出发酶 4.5 倍的突变体 3-1B2. 基因比对结果表明, 共有两个氨基酸发生了突变. 突变酶的酶学性质研究发现, 与野生酶相比, 它的热稳定性及 pH 稳定性略有增加, 最适温度和最适 pH 值则无太大的变化. 同源模建了 BSL2 与 3-1B2 的结构, 并与底物进行了分子对接. 结果表明, 突变体 3-1B2 的结合能比野生型 BSL2 低 1.29 kcal/mol, 活性中心 Ser77 残基与底物羰基的距离也由 0.319 nm 减小为 0.278 nm, 因而加快了酶反应速度, 提高了酶活力.
통과정향진화적방법, 제고료일개신적원우고초아포간균 (Bacillus subtilis) 적지방매 (BSL2) 적활력. 경과량륜역착 PCR 이급고통량사선, 최종획득료비활력위야생출발매 4.5 배적돌변체 3-1B2. 기인비대결과표명, 공유량개안기산발생료돌변. 돌변매적매학성질연구발현, 여야생매상비, 타적열은정성급 pH 은정성략유증가, 최괄온도화최괄 pH 치칙무태대적변화. 동원모건료 BSL2 여 3-1B2 적결구, 병여저물진행료분자대접. 결과표명, 돌변체 3-1B2 적결합능비야생형 BSL2 저 1.29 kcal/mol, 활성중심 Ser77 잔기여저물탄기적거리야유 0.319 nm 감소위 0.278 nm, 인이가쾌료매반응속도, 제고료매활력.