南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2009年
4期
593-597
,共5页
姚娟%丁彦青%周军%柳玉红%李建明
姚娟%丁彥青%週軍%柳玉紅%李建明
요연%정언청%주군%류옥홍%리건명
PRL-3%CDH22%RNA干扰%慢病毒%结直肠癌
PRL-3%CDH22%RNA榦擾%慢病毒%結直腸癌
PRL-3%CDH22%RNA간우%만병독%결직장암
目的 建立稳定干扰PRL-3及CDH-22基因的结直肠癌细胞株,为探讨PRL-3、CDH22及其相互作用在结直肠发生及转移中的作用提供理想的细胞模型.方法 以稳定干扰人PRL-3基因大肠癌SW480细胞的克隆为基础,以靶向人CDH22基因的RNAi慢病毒再次感染该细胞株,将经慢病毒二次感染的细胞悬液通过有限稀释法制备细胞单克隆,各细胞克隆扩大培养,荧光定量PCR检测各细胞克降PRL-3及CDH22mRNA表达水平.结果 应用于二次感染的慢病毒悬液的滴度为8×105U/ml.综合分析荧光定量PCR结果,所获得的细胞克隆中1号克隆PRL-3及CDH22mRNA水平的表达显著降低.结论 成功建立PRL-3及CDH-22基因稳定敲低的大肠癌细胞克隆,探索同时敲低2个基因的慢病毒RNAi技术.
目的 建立穩定榦擾PRL-3及CDH-22基因的結直腸癌細胞株,為探討PRL-3、CDH22及其相互作用在結直腸髮生及轉移中的作用提供理想的細胞模型.方法 以穩定榦擾人PRL-3基因大腸癌SW480細胞的剋隆為基礎,以靶嚮人CDH22基因的RNAi慢病毒再次感染該細胞株,將經慢病毒二次感染的細胞懸液通過有限稀釋法製備細胞單剋隆,各細胞剋隆擴大培養,熒光定量PCR檢測各細胞剋降PRL-3及CDH22mRNA錶達水平.結果 應用于二次感染的慢病毒懸液的滴度為8×105U/ml.綜閤分析熒光定量PCR結果,所穫得的細胞剋隆中1號剋隆PRL-3及CDH22mRNA水平的錶達顯著降低.結論 成功建立PRL-3及CDH-22基因穩定敲低的大腸癌細胞剋隆,探索同時敲低2箇基因的慢病毒RNAi技術.
목적 건립은정간우PRL-3급CDH-22기인적결직장암세포주,위탐토PRL-3、CDH22급기상호작용재결직장발생급전이중적작용제공이상적세포모형.방법 이은정간우인PRL-3기인대장암SW480세포적극륭위기출,이파향인CDH22기인적RNAi만병독재차감염해세포주,장경만병독이차감염적세포현액통과유한희석법제비세포단극륭,각세포극륭확대배양,형광정량PCR검측각세포극강PRL-3급CDH22mRNA표체수평.결과 응용우이차감염적만병독현액적적도위8×105U/ml.종합분석형광정량PCR결과,소획득적세포극륭중1호극륭PRL-3급CDH22mRNA수평적표체현저강저.결론 성공건립PRL-3급CDH-22기인은정고저적대장암세포극륭,탐색동시고저2개기인적만병독RNAi기술.
