华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2010年
2期
175-178
,共4页
王桂华%孙黎%邓豫%李小兰%曹小年%来森艳%陶德定%胡俊波
王桂華%孫黎%鄧豫%李小蘭%曹小年%來森豔%陶德定%鬍俊波
왕계화%손려%산예%리소란%조소년%래삼염%도덕정%호준파
TAT-N24穿膜融合多肽%HT29细胞%肿瘤分子治疗
TAT-N24穿膜融閤多肽%HT29細胞%腫瘤分子治療
TAT-N24천막융합다태%HT29세포%종류분자치료
目的 表达并纯化TAT-N24穿膜融合多肽,初步探讨其生物学活性.方法 构建pTAT-HA-N24原核表达载体,在BL21大肠埃希菌中表达并纯化TAT-N24融合多肽,利用SDS凝胶电泳检测纯化蛋白的纯度,利用免疫细胞化学和流式细胞术检测TAT-N24融合蛋白的穿膜能力和生物学活性.结果 在原核表达系统中成功构建并表达纯化了TAT-N24穿膜融合多肽,其在6 mol/L尿素和DMSO中均具有较好的溶解性,纯化的融合多肽经SDS凝胶电泳分析未见明显杂蛋白混入,利用免疫细胞化学染色可见TAT-N24处理结肠HT29细胞12 h后90%以上的细胞中可检测到TAT-N24,流式细胞术检测细胞周期可见TAT-N24能够有效地诱导细胞周期阻滞,抑制结肠癌细胞生长.结论 TAT-N24具有高效的穿膜能力,并能有效抑制结肠癌细胞增殖,可望开发成为有效的肿瘤分子治疗药物.
目的 錶達併純化TAT-N24穿膜融閤多肽,初步探討其生物學活性.方法 構建pTAT-HA-N24原覈錶達載體,在BL21大腸埃希菌中錶達併純化TAT-N24融閤多肽,利用SDS凝膠電泳檢測純化蛋白的純度,利用免疫細胞化學和流式細胞術檢測TAT-N24融閤蛋白的穿膜能力和生物學活性.結果 在原覈錶達繫統中成功構建併錶達純化瞭TAT-N24穿膜融閤多肽,其在6 mol/L尿素和DMSO中均具有較好的溶解性,純化的融閤多肽經SDS凝膠電泳分析未見明顯雜蛋白混入,利用免疫細胞化學染色可見TAT-N24處理結腸HT29細胞12 h後90%以上的細胞中可檢測到TAT-N24,流式細胞術檢測細胞週期可見TAT-N24能夠有效地誘導細胞週期阻滯,抑製結腸癌細胞生長.結論 TAT-N24具有高效的穿膜能力,併能有效抑製結腸癌細胞增殖,可望開髮成為有效的腫瘤分子治療藥物.
목적 표체병순화TAT-N24천막융합다태,초보탐토기생물학활성.방법 구건pTAT-HA-N24원핵표체재체,재BL21대장애희균중표체병순화TAT-N24융합다태,이용SDS응효전영검측순화단백적순도,이용면역세포화학화류식세포술검측TAT-N24융합단백적천막능력화생물학활성.결과 재원핵표체계통중성공구건병표체순화료TAT-N24천막융합다태,기재6 mol/L뇨소화DMSO중균구유교호적용해성,순화적융합다태경SDS응효전영분석미견명현잡단백혼입,이용면역세포화학염색가견TAT-N24처리결장HT29세포12 h후90%이상적세포중가검측도TAT-N24,류식세포술검측세포주기가견TAT-N24능구유효지유도세포주기조체,억제결장암세포생장.결론 TAT-N24구유고효적천막능력,병능유효억제결장암세포증식,가망개발성위유효적종류분자치료약물.
