南京师大学报（自然科学版）
南京師大學報（自然科學版）
남경사대학보（자연과학판）
JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)
2010年
2期
96-103
,共8页
张锋%王期%李桂兰%徐健红%洪素丽%岳玲%冯志勇%殷志敏
張鋒%王期%李桂蘭%徐健紅%洪素麗%嶽玲%馮誌勇%慇誌敏
장봉%왕기%리계란%서건홍%홍소려%악령%풍지용%은지민
谷氨酰胺合成酶%重组大肠杆菌%分批补料培养%高密度培养
穀氨酰胺閤成酶%重組大腸桿菌%分批補料培養%高密度培養
곡안선알합성매%중조대장간균%분비보료배양%고밀도배양
为了建立枯草杆菌谷氨酰胺合成酶基因重组工程菌BL21/pET28b-glnA的高密度培养工艺,首先以摇瓶培养为基础,对影响工程菌生长及目的蛋白表达的因素如培养基、pH值、诱导剂浓度及时间等进行优化,再扩大至BIOTECH-SBG(5 L)自动玻璃发酵罐培养,利用溶氧反馈补料策略进行分批补料,并在培养过程中保持20%～50%的溶解氧,7.0～7.5的pH,以及1.0g/L乳糖诱导12 h,成功地进行了工程菌的高密度培养,最终细菌干重达到48.1 g/L,目的蛋白的表达量占菌体蛋白总量的55%,粗提物酶比活为10.35 U/mg,整个补料过程细菌比生长率稳定的控制在0.1 h-1左右.
為瞭建立枯草桿菌穀氨酰胺閤成酶基因重組工程菌BL21/pET28b-glnA的高密度培養工藝,首先以搖瓶培養為基礎,對影響工程菌生長及目的蛋白錶達的因素如培養基、pH值、誘導劑濃度及時間等進行優化,再擴大至BIOTECH-SBG(5 L)自動玻璃髮酵罐培養,利用溶氧反饋補料策略進行分批補料,併在培養過程中保持20%～50%的溶解氧,7.0～7.5的pH,以及1.0g/L乳糖誘導12 h,成功地進行瞭工程菌的高密度培養,最終細菌榦重達到48.1 g/L,目的蛋白的錶達量佔菌體蛋白總量的55%,粗提物酶比活為10.35 U/mg,整箇補料過程細菌比生長率穩定的控製在0.1 h-1左右.
위료건립고초간균곡안선알합성매기인중조공정균BL21/pET28b-glnA적고밀도배양공예,수선이요병배양위기출,대영향공정균생장급목적단백표체적인소여배양기、pH치、유도제농도급시간등진행우화,재확대지BIOTECH-SBG(5 L)자동파리발효관배양,이용용양반궤보료책략진행분비보료,병재배양과정중보지20%～50%적용해양,7.0～7.5적pH,이급1.0g/L유당유도12 h,성공지진행료공정균적고밀도배양,최종세균간중체도48.1 g/L,목적단백적표체량점균체단백총량적55%,조제물매비활위10.35 U/mg,정개보료과정세균비생장솔은정적공제재0.1 h-1좌우.
