中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2010年
3期
683-685
,共3页
同源盒基因%hoxA10%逆转录病毒载体
同源盒基因%hoxA10%逆轉錄病毒載體
동원합기인%hoxA10%역전록병독재체
本研究构建携带同源盒基因hoxA10的重组逆转录病毒载体,并建立稳定产毒的包装细胞株.通过PCR扩增获得hoxA10基因编码区全长序列,克隆至逆转录病毒载体MSCVneo,并测序鉴定插入的hoxA10基因.将重组载体及空载体经脂质体分别转染包装细胞系PT67,以G418筛选稳定产毒细胞株.收集病毒悬液并测定病毒滴度.结果表明:重组逆转录病毒载体MSCVneo插入的hoxA10基因序列正确.将筛选所得的高效产毒细胞株命名为PT67/MSCVneo、PT67/MSCVneo-hoxA10.测定病毒滴度分别为5×105CPU/ml、4×104CFU/ml.结论:成功构建了同源盒基因hoxA10的重组逆转录病毒载体,建立了稳定、高效、准确产生逆转录病毒的细胞株,为探讨hoxA10基因在造血干细胞的增殖和分化功能提供了实验基础.
本研究構建攜帶同源盒基因hoxA10的重組逆轉錄病毒載體,併建立穩定產毒的包裝細胞株.通過PCR擴增穫得hoxA10基因編碼區全長序列,剋隆至逆轉錄病毒載體MSCVneo,併測序鑒定插入的hoxA10基因.將重組載體及空載體經脂質體分彆轉染包裝細胞繫PT67,以G418篩選穩定產毒細胞株.收集病毒懸液併測定病毒滴度.結果錶明:重組逆轉錄病毒載體MSCVneo插入的hoxA10基因序列正確.將篩選所得的高效產毒細胞株命名為PT67/MSCVneo、PT67/MSCVneo-hoxA10.測定病毒滴度分彆為5×105CPU/ml、4×104CFU/ml.結論:成功構建瞭同源盒基因hoxA10的重組逆轉錄病毒載體,建立瞭穩定、高效、準確產生逆轉錄病毒的細胞株,為探討hoxA10基因在造血榦細胞的增殖和分化功能提供瞭實驗基礎.
본연구구건휴대동원합기인hoxA10적중조역전록병독재체,병건립은정산독적포장세포주.통과PCR확증획득hoxA10기인편마구전장서렬,극륭지역전록병독재체MSCVneo,병측서감정삽입적hoxA10기인.장중조재체급공재체경지질체분별전염포장세포계PT67,이G418사선은정산독세포주.수집병독현액병측정병독적도.결과표명:중조역전록병독재체MSCVneo삽입적hoxA10기인서렬정학.장사선소득적고효산독세포주명명위PT67/MSCVneo、PT67/MSCVneo-hoxA10.측정병독적도분별위5×105CPU/ml、4×104CFU/ml.결론:성공구건료동원합기인hoxA10적중조역전록병독재체,건립료은정、고효、준학산생역전록병독적세포주,위탐토hoxA10기인재조혈간세포적증식화분화공능제공료실험기출.
