微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2010年
6期
32-38
,共7页
段效辉%耿金培%方绍庆%李俊峰
段效輝%耿金培%方紹慶%李俊峰
단효휘%경금배%방소경%리준봉
短梗霉%葡萄糖基转移酶%胞内酶%纯化
短梗黴%葡萄糖基轉移酶%胞內酶%純化
단경매%포도당기전이매%포내매%순화
运用离子交换层析法和凝胶过滤层析法分离纯化普鲁兰多糖高产菌株Y68胞内葡萄糖基转移酶(简称GTF),并以SDS-PAGE、Native-PAGE对蛋白质进行量化、比较及特性鉴定,研究其酶学特性.结果表明短梗霉Y68中GTF被分离纯化,纯化酶在SDS-PAGE凝胶电泳上显示分子量50.8 ku单一条带,而在Native-PAGE凝胶电泳上显示分子量350 ku单一条带.纯化酶的最适酶反应pH和最适酶反应温度分别为6.0和40℃,酶对pH十分敏感,稳定性较差,对温度的稳定性则稍好.GTF为金属酶,Na+和K+对酶有激活作用,Ca2+、Mn2+、Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Hg2+、Co2+对酶活性有抑制作用,Hg2+对酶活性的抑制作用说明酶活性中心含有二铳键.EDTA、PMSF、SDS和碘乙酸对GTF活性有很大的抑制作用,而二硫苏糖醇(DTT)对酶活性有保护作用.
運用離子交換層析法和凝膠過濾層析法分離純化普魯蘭多糖高產菌株Y68胞內葡萄糖基轉移酶(簡稱GTF),併以SDS-PAGE、Native-PAGE對蛋白質進行量化、比較及特性鑒定,研究其酶學特性.結果錶明短梗黴Y68中GTF被分離純化,純化酶在SDS-PAGE凝膠電泳上顯示分子量50.8 ku單一條帶,而在Native-PAGE凝膠電泳上顯示分子量350 ku單一條帶.純化酶的最適酶反應pH和最適酶反應溫度分彆為6.0和40℃,酶對pH十分敏感,穩定性較差,對溫度的穩定性則稍好.GTF為金屬酶,Na+和K+對酶有激活作用,Ca2+、Mn2+、Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Hg2+、Co2+對酶活性有抑製作用,Hg2+對酶活性的抑製作用說明酶活性中心含有二銃鍵.EDTA、PMSF、SDS和碘乙痠對GTF活性有很大的抑製作用,而二硫囌糖醇(DTT)對酶活性有保護作用.
운용리자교환층석법화응효과려층석법분리순화보로란다당고산균주Y68포내포도당기전이매(간칭GTF),병이SDS-PAGE、Native-PAGE대단백질진행양화、비교급특성감정,연구기매학특성.결과표명단경매Y68중GTF피분리순화,순화매재SDS-PAGE응효전영상현시분자량50.8 ku단일조대,이재Native-PAGE응효전영상현시분자량350 ku단일조대.순화매적최괄매반응pH화최괄매반응온도분별위6.0화40℃,매대pH십분민감,은정성교차,대온도적은정성칙초호.GTF위금속매,Na+화K+대매유격활작용,Ca2+、Mn2+、Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Hg2+、Co2+대매활성유억제작용,Hg2+대매활성적억제작용설명매활성중심함유이총건.EDTA、PMSF、SDS화전을산대GTF활성유흔대적억제작용,이이류소당순(DTT)대매활성유보호작용.
