暨南大学学报(自然科学与医学版)
暨南大學學報(自然科學與醫學版)
기남대학학보(자연과학여의학판)
JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION)
2011年
1期
80-87
,共8页
陈亮%梁旭方%瞿春梅%杜嵇华%刘秀霞%何珊
陳亮%樑旭方%瞿春梅%杜嵇華%劉秀霞%何珊
진량%량욱방%구춘매%두혜화%류수하%하산
草鱼%过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)%cDNA序列%克隆%组成型表达
草魚%過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)%cDNA序列%剋隆%組成型錶達
초어%과양화물매체증식물격활수체(PPAR)%cDNA서렬%극륭%조성형표체
过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)是核激素受体超家族成员之一,分α,β,γ 3个亚型,PPAR具有多种生物学效能,对其基因进行研究将有助于揭示草食性鱼类对营养物利用规律及其机制.通过简并引物克隆草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PPAR基因cDNA核心序列,应用3'RACE技术扩增该序列的3'末端序列,并对其进行序列分析,最后用荧光定量PCR方法比较草鱼肝脏、脑、脾脏、肌肉、脂肪和心脏的PPARα、PPARβ和PPARγ基因mRNA相对表达水平.序列分析结果表明,草鱼PPARα、PPARβ和PPARy基因cDNA核心序列片段大小为631 bp,604 bp和651 bp,分别编码210、201和217个氨基酸,PPARy经3'RACE后共获得大小为1 331 bp的片段,编码337个氨基酸.草鱼与鲤鱼(Cyprinus carpio)、斑马鱼(Danio rerio)、鲈鱼(Lateolabrax japonicus)等鱼类PPAR氨基酸序列同源性很高,为71.4%~96.1%;与人(Homo sapiens)、大鼠(Rattus norvegicus)、小鼠(Mus musculus)、牛(Bos taurus)等哺乳动物PPAR氨基酸序列的同源性也较高,为65.0%~77.6%;与非洲爪蟾(Xenopus laevis)等两栖动物PPAR氨基酸序列的同源性约为67.0%.荧光定量PCR结果表明,草鱼PPARα于肝脏,PPARβ于肝脏、肌肉和心脏,PPARγ于肝脏的表达相对较高.相同物种不同PPAR亚型的同源性较低,而不同物种同型PPAR同源性很高,反映了不同亚型在结构上的差异,这与其在功能上的差异是相一致的.
過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)是覈激素受體超傢族成員之一,分α,β,γ 3箇亞型,PPAR具有多種生物學效能,對其基因進行研究將有助于揭示草食性魚類對營養物利用規律及其機製.通過簡併引物剋隆草魚(Ctenopharyngodon idellus)PPAR基因cDNA覈心序列,應用3'RACE技術擴增該序列的3'末耑序列,併對其進行序列分析,最後用熒光定量PCR方法比較草魚肝髒、腦、脾髒、肌肉、脂肪和心髒的PPARα、PPARβ和PPARγ基因mRNA相對錶達水平.序列分析結果錶明,草魚PPARα、PPARβ和PPARy基因cDNA覈心序列片段大小為631 bp,604 bp和651 bp,分彆編碼210、201和217箇氨基痠,PPARy經3'RACE後共穫得大小為1 331 bp的片段,編碼337箇氨基痠.草魚與鯉魚(Cyprinus carpio)、斑馬魚(Danio rerio)、鱸魚(Lateolabrax japonicus)等魚類PPAR氨基痠序列同源性很高,為71.4%~96.1%;與人(Homo sapiens)、大鼠(Rattus norvegicus)、小鼠(Mus musculus)、牛(Bos taurus)等哺乳動物PPAR氨基痠序列的同源性也較高,為65.0%~77.6%;與非洲爪蟾(Xenopus laevis)等兩棲動物PPAR氨基痠序列的同源性約為67.0%.熒光定量PCR結果錶明,草魚PPARα于肝髒,PPARβ于肝髒、肌肉和心髒,PPARγ于肝髒的錶達相對較高.相同物種不同PPAR亞型的同源性較低,而不同物種同型PPAR同源性很高,反映瞭不同亞型在結構上的差異,這與其在功能上的差異是相一緻的.
과양화물매체증식물격활수체(PPAR)시핵격소수체초가족성원지일,분α,β,γ 3개아형,PPAR구유다충생물학효능,대기기인진행연구장유조우게시초식성어류대영양물이용규률급기궤제.통과간병인물극륭초어(Ctenopharyngodon idellus)PPAR기인cDNA핵심서렬,응용3'RACE기술확증해서렬적3'말단서렬,병대기진행서렬분석,최후용형광정량PCR방법비교초어간장、뇌、비장、기육、지방화심장적PPARα、PPARβ화PPARγ기인mRNA상대표체수평.서렬분석결과표명,초어PPARα、PPARβ화PPARy기인cDNA핵심서렬편단대소위631 bp,604 bp화651 bp,분별편마210、201화217개안기산,PPARy경3'RACE후공획득대소위1 331 bp적편단,편마337개안기산.초어여리어(Cyprinus carpio)、반마어(Danio rerio)、로어(Lateolabrax japonicus)등어류PPAR안기산서렬동원성흔고,위71.4%~96.1%;여인(Homo sapiens)、대서(Rattus norvegicus)、소서(Mus musculus)、우(Bos taurus)등포유동물PPAR안기산서렬적동원성야교고,위65.0%~77.6%;여비주조섬(Xenopus laevis)등량서동물PPAR안기산서렬적동원성약위67.0%.형광정량PCR결과표명,초어PPARα우간장,PPARβ우간장、기육화심장,PPARγ우간장적표체상대교고.상동물충불동PPAR아형적동원성교저,이불동물충동형PPAR동원성흔고,반영료불동아형재결구상적차이,저여기재공능상적차이시상일치적.