中国畜牧杂志
中國畜牧雜誌
중국축목잡지
CHINESE JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE
2011年
7期
6-10
,共5页
秦玉蓉%许峰%高波%宋正海%范广习%李碧春
秦玉蓉%許峰%高波%宋正海%範廣習%李碧春
진옥용%허봉%고파%송정해%범엄습%리벽춘
过氧化氢酶体激活增殖受体%真核表达%NIH-3T3细胞%荧光蛋白%徐淮山羊
過氧化氫酶體激活增殖受體%真覈錶達%NIH-3T3細胞%熒光蛋白%徐淮山羊
과양화경매체격활증식수체%진핵표체%NIH-3T3세포%형광단백%서회산양
研究旨在克隆徐淮山羊过氧化物酶体激活增殖受体(PPAR)基因的cDNA,并通过EGFP融合蛋白对该基因产物亚细胞水平定位.采用RT-PCR方法克隆徐淮山羊脂肪组织 PPAR 基因 cDNA,并构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的融合表达载体pEGFP-C1-PPAR,聚乙烯亚胺(PEI)介导基因转染 NIH-3T3细胞,48h后荧光倒置显微镜下观察基因表达产物的分布,RT-PCR检测mRNA在体外水平的表达.结果表明:首次成功克隆出徐淮山羊PPAR基因的全序列cDNA,大小为1 428 bp,GenBank登录号为GUO82382;构建了融合表达载体pEGFP-C1-PPAR;RT-PCR检测mRNA表达明显;EGFP-PPAR融合蛋白定位在NIT-3T3细胞质中.体外克隆的徐淮山羊PPAR基因cDNA,在单细胞水平上可表达于细胞质中,结果为进一步研究PPAR的生物学功能奠定基础.
研究旨在剋隆徐淮山羊過氧化物酶體激活增殖受體(PPAR)基因的cDNA,併通過EGFP融閤蛋白對該基因產物亞細胞水平定位.採用RT-PCR方法剋隆徐淮山羊脂肪組織 PPAR 基因 cDNA,併構建含有增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)報告基因的融閤錶達載體pEGFP-C1-PPAR,聚乙烯亞胺(PEI)介導基因轉染 NIH-3T3細胞,48h後熒光倒置顯微鏡下觀察基因錶達產物的分佈,RT-PCR檢測mRNA在體外水平的錶達.結果錶明:首次成功剋隆齣徐淮山羊PPAR基因的全序列cDNA,大小為1 428 bp,GenBank登錄號為GUO82382;構建瞭融閤錶達載體pEGFP-C1-PPAR;RT-PCR檢測mRNA錶達明顯;EGFP-PPAR融閤蛋白定位在NIT-3T3細胞質中.體外剋隆的徐淮山羊PPAR基因cDNA,在單細胞水平上可錶達于細胞質中,結果為進一步研究PPAR的生物學功能奠定基礎.
연구지재극륭서회산양과양화물매체격활증식수체(PPAR)기인적cDNA,병통과EGFP융합단백대해기인산물아세포수평정위.채용RT-PCR방법극륭서회산양지방조직 PPAR 기인 cDNA,병구건함유증강형록색형광단백(EGFP)보고기인적융합표체재체pEGFP-C1-PPAR,취을희아알(PEI)개도기인전염 NIH-3T3세포,48h후형광도치현미경하관찰기인표체산물적분포,RT-PCR검측mRNA재체외수평적표체.결과표명:수차성공극륭출서회산양PPAR기인적전서렬cDNA,대소위1 428 bp,GenBank등록호위GUO82382;구건료융합표체재체pEGFP-C1-PPAR;RT-PCR검측mRNA표체명현;EGFP-PPAR융합단백정위재NIT-3T3세포질중.체외극륭적서회산양PPAR기인cDNA,재단세포수평상가표체우세포질중,결과위진일보연구PPAR적생물학공능전정기출.
