哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
4期
340-345
,共6页
陈涵枝%刘殿阁%周建东%沈京群
陳涵枝%劉殿閣%週建東%瀋京群
진함지%류전각%주건동%침경군
糖尿病肾病%免疫组织化学%Ets-1%基质金属蛋白酶-2%基质金属蛋白酶-2组织抑制剂%Ⅳ型胶原
糖尿病腎病%免疫組織化學%Ets-1%基質金屬蛋白酶-2%基質金屬蛋白酶-2組織抑製劑%Ⅳ型膠原
당뇨병신병%면역조직화학%Ets-1%기질금속단백매-2%기질금속단백매-2조직억제제%Ⅳ형효원
目的 观察转录因子Ets-1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-2组织抑制剂(TIMP-2)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)在实验性糖尿病肾病(DN)进程中的表达及意义.方法 雄性SD大鼠随机分成对照组(NC组,n=30)；糖尿病组(DM组,n=40),腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病动物模型.STZ注射后第1、4、8、12、16周分别处死各实验组动物6～8只,采用免疫组化观察各组大鼠肾内Ets-1、MMP-2、TIMP-2、α-SMA及ColⅣ表达,并进行免疫双染共定位分析.结果 免疫组化表明,同NC组相比,DM组Ets-1在肾小球、肾小管间质的表达于STZ注射后第1周明显增加(P＜0.05),至第4、8周分别达到高峰(P＜0.05),随后呈下降趋势,16周降至最低(P＞0.05).MMP-2在肾小球内的表达与Ets-1在肾小球内的表达相似；DM组TIMP-2在肾小球及肾小管间质的表达于STZ注射后第1周开始增加,第16周升至最高(P＜0.01)；肾小球内MMP-2/TIMP-2比率于STZ注射后第1周显著性升高(P＜0.01),第4周起明显下降(P＜0.01),第12、16周时甚至低于相同时间点NC组大鼠,有显著性统计学差异(均P＜0.01),而肾小管间质内MMP-2/TIMP-2比率于STZ注射后第4周开始明显降低(P＜0.05),并且随病程进展进一步下降；DM组ColⅣ在肾小球及肾小管间质内的沉积于STZ注射后第1周开始增加,第16周达高峰(P＜0.05).c-SMA在肾小球内及肾小管间质的表达于STZ注射后第1周开始增加,并且随病程进展逐渐增加,第16周升至最高(P＜0.05).相关分析表明,DM组肾小球及肾小管间质内Ets-1表达与MMP-2的表达呈显著正相关(r=0.856,P＜0.01;r=0.642,P＜0.01),而与MMP-2/TIMP-2比率呈负相关(r=- 0.549,P＜0.01;r=-0.580,P＜0.01);MMP-2/TIMP-2比率与ColⅣ的表达呈显著负相关(r=-0.701,P＜0.01；r=-0.626,P＜0.01).免疫双染显示,Ets-1阳性的肾小球固有细胞及肾小管间质细胞同时出现MMP-2阳性表达,TIMP-2染色阳性的肾小球固有细胞及肾小管间质细胞同时具有α-SMA阳性表达.结论 Ets-1转录因子可能通过调节MMP-2/TIMP-2系统平衡而影响细胞外基质(ECM)沉积,对DN基质重塑起关键性作用.
目的 觀察轉錄因子Ets-1、基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質金屬蛋白酶-2組織抑製劑(TIMP-2)、平滑肌肌動蛋白(α-SMA)及Ⅳ型膠原(ColⅣ)在實驗性糖尿病腎病(DN)進程中的錶達及意義.方法 雄性SD大鼠隨機分成對照組(NC組,n=30)；糖尿病組(DM組,n=40),腹腔註射鏈脲佐菌素(STZ)誘導糖尿病動物模型.STZ註射後第1、4、8、12、16週分彆處死各實驗組動物6～8隻,採用免疫組化觀察各組大鼠腎內Ets-1、MMP-2、TIMP-2、α-SMA及ColⅣ錶達,併進行免疫雙染共定位分析.結果 免疫組化錶明,同NC組相比,DM組Ets-1在腎小毬、腎小管間質的錶達于STZ註射後第1週明顯增加(P＜0.05),至第4、8週分彆達到高峰(P＜0.05),隨後呈下降趨勢,16週降至最低(P＞0.05).MMP-2在腎小毬內的錶達與Ets-1在腎小毬內的錶達相似；DM組TIMP-2在腎小毬及腎小管間質的錶達于STZ註射後第1週開始增加,第16週升至最高(P＜0.01)；腎小毬內MMP-2/TIMP-2比率于STZ註射後第1週顯著性升高(P＜0.01),第4週起明顯下降(P＜0.01),第12、16週時甚至低于相同時間點NC組大鼠,有顯著性統計學差異(均P＜0.01),而腎小管間質內MMP-2/TIMP-2比率于STZ註射後第4週開始明顯降低(P＜0.05),併且隨病程進展進一步下降；DM組ColⅣ在腎小毬及腎小管間質內的沉積于STZ註射後第1週開始增加,第16週達高峰(P＜0.05).c-SMA在腎小毬內及腎小管間質的錶達于STZ註射後第1週開始增加,併且隨病程進展逐漸增加,第16週升至最高(P＜0.05).相關分析錶明,DM組腎小毬及腎小管間質內Ets-1錶達與MMP-2的錶達呈顯著正相關(r=0.856,P＜0.01;r=0.642,P＜0.01),而與MMP-2/TIMP-2比率呈負相關(r=- 0.549,P＜0.01;r=-0.580,P＜0.01);MMP-2/TIMP-2比率與ColⅣ的錶達呈顯著負相關(r=-0.701,P＜0.01；r=-0.626,P＜0.01).免疫雙染顯示,Ets-1暘性的腎小毬固有細胞及腎小管間質細胞同時齣現MMP-2暘性錶達,TIMP-2染色暘性的腎小毬固有細胞及腎小管間質細胞同時具有α-SMA暘性錶達.結論 Ets-1轉錄因子可能通過調節MMP-2/TIMP-2繫統平衡而影響細胞外基質(ECM)沉積,對DN基質重塑起關鍵性作用.
목적 관찰전록인자Ets-1、기질금속단백매-2(MMP-2)、기질금속단백매-2조직억제제(TIMP-2)、평활기기동단백(α-SMA)급Ⅳ형효원(ColⅣ)재실험성당뇨병신병(DN)진정중적표체급의의.방법 웅성SD대서수궤분성대조조(NC조,n=30)；당뇨병조(DM조,n=40),복강주사련뇨좌균소(STZ)유도당뇨병동물모형.STZ주사후제1、4、8、12、16주분별처사각실험조동물6～8지,채용면역조화관찰각조대서신내Ets-1、MMP-2、TIMP-2、α-SMA급ColⅣ표체,병진행면역쌍염공정위분석.결과 면역조화표명,동NC조상비,DM조Ets-1재신소구、신소관간질적표체우STZ주사후제1주명현증가(P＜0.05),지제4、8주분별체도고봉(P＜0.05),수후정하강추세,16주강지최저(P＞0.05).MMP-2재신소구내적표체여Ets-1재신소구내적표체상사；DM조TIMP-2재신소구급신소관간질적표체우STZ주사후제1주개시증가,제16주승지최고(P＜0.01)；신소구내MMP-2/TIMP-2비솔우STZ주사후제1주현저성승고(P＜0.01),제4주기명현하강(P＜0.01),제12、16주시심지저우상동시간점NC조대서,유현저성통계학차이(균P＜0.01),이신소관간질내MMP-2/TIMP-2비솔우STZ주사후제4주개시명현강저(P＜0.05),병차수병정진전진일보하강；DM조ColⅣ재신소구급신소관간질내적침적우STZ주사후제1주개시증가,제16주체고봉(P＜0.05).c-SMA재신소구내급신소관간질적표체우STZ주사후제1주개시증가,병차수병정진전축점증가,제16주승지최고(P＜0.05).상관분석표명,DM조신소구급신소관간질내Ets-1표체여MMP-2적표체정현저정상관(r=0.856,P＜0.01;r=0.642,P＜0.01),이여MMP-2/TIMP-2비솔정부상관(r=- 0.549,P＜0.01;r=-0.580,P＜0.01);MMP-2/TIMP-2비솔여ColⅣ적표체정현저부상관(r=-0.701,P＜0.01；r=-0.626,P＜0.01).면역쌍염현시,Ets-1양성적신소구고유세포급신소관간질세포동시출현MMP-2양성표체,TIMP-2염색양성적신소구고유세포급신소관간질세포동시구유α-SMA양성표체.결론 Ets-1전록인자가능통과조절MMP-2/TIMP-2계통평형이영향세포외기질(ECM)침적,대DN기질중소기관건성작용.
